Question

【题目】Ⅰ多氯联苯（PCB)是一种对人体有害的有机物，某科技小组欲从受PCB污 染的土壤中分离出能分解PCB的细菌。请回答下列问题：

（1）要从受PCB污染的土壤中分离出能分解PCB的细菌，应配制以______作为 唯一碳源的选择培养基；配制培养基时用到的玻璃器皿需用______方法进行灭菌。

（2）分离前一可通过选择培养增加土壤中PCB分解菌的浓度，选择培养时需要不断震荡 锥形瓶的目的是______。

（3）用稀释涂布平板法统计PCB分解菌的浓度时，常需同时培养空白培养基，其目的是_______。某同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、 169和176，取平均值 124。我们认为该同学的结果可信度低，其原因是___。

Ⅱ.胡萝卜中含有大量的β一胡萝卜素，被摄入到人体消化器官后，可以转化 成维生素A0多一胡萝卜素可以维持眼睛和皮肽的健康，改善夜育症、皮肤粗糙的状况，有 助于身体免受自由基的伤害。请回答下列问题：

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，萃取剂宜选用____（填“石油醚”或“乙 醇”或“乙酸乙酷”)，主要原因是___________（答出两点即可）。

（2）利用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤包括：胡萝卜→粉碎干燥→萃取→过滤→浓 缩→胡萝卜素。如图装置可用于上述的______步骤，装置中锥形瓶收集的是_________

（3）如图装置中，采用水浴加热的目的是____

Answer 1

【答案】多氯联苯（PCB） 干热灭菌 让PCB分解菌充分利用营养物质 检测所用培养基灭菌是否彻底 该同学的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差 石油醚 ①具有较高的沸点；②能够充分溶解胡萝卜素；③不与水混 浓缩 萃取剂（或：石油醚） 防止明火加热引起有机溶剂燃烧爆炸

【解析】

统计菌落数目的方法

（1）显微镜直接计数法

①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。

（2）间接计数法（活菌计数法）

①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作

a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性。

b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

Ⅰ．（1）本题欲从受PCB污染的土壤中分离出能分解PCB的细菌，所以需要用PCB做唯一碳源，培养基配置时所用到的玻璃器皿需要用干热灭菌。

（2）选择培养的目的是增加PCB菌的浓度，所以不断震荡的目的是使PCB菌与培养液中的营养物质充分接触，充分利用。

（3）设置空白培养基的目的是检测灭菌效果，如果空白培养基中有菌落的形成，证明灭菌不合格，实验需要重做，如果空白培养基中没有菌落的形成，证明实验过程中灭菌合格；1个平板的计数为27与另两个差距太悬殊所以认为可信度比较低。

Ⅱ． （1）胡萝卜素的提取过程中，需要用沸点相对较高的，不溶于水的有机溶剂，其中符合条件的为石油醚。

（2）图为蒸馏装置，所以此装置应用在浓缩过程中，将萃取剂通过蒸馏，冷凝最后回收到锥形瓶中。

（3）由于实验中用到的有机溶剂多为易燃易爆试剂，所以要避免明火用水浴加热。