Question

(15分)生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如左表所示，实验步骤如右图所示。请分析回答问题：

（1）培养基中加入尿素的目的是___________，原理是_____________。从同化作用类型来看的，该菌属于____________________。

（2）实验需要振荡培养，原因是______________。转为固体培养时，常采用________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体。其中需要灭菌是____________（填序号）。

（4）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有__________（填序号）

①取样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照

（5）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入_________指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素。理由是_____________________。

（6）为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果如下表，其中_____________倍的稀释比较合适。

Answer 1

（1）筛选目的菌 只有能合成脲酶的细菌才能分解尿素，在该培养基上生长

异养型

（2）为目的菌提供氧气 涂布平板法 （3）①和② （4）①②③

（5）酚红指示剂 细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH增高，使酚红指示剂变红(2分)

（6）106或105

【解析】

试题分析：

（1）培养基中加入尿素的目的是筛选能高效降解尿素的目的菌，其原理是只有能合成脲酶的细菌才能分解尿素，才能在以尿素为氮源的培养基上生长；由于培养基中需要的碳源为葡萄糖，说明该菌不能自己制造有机物，为异养型生物。

（2）振荡培养的目的是为目的菌提供氧气；转为固体培养时，要想获得单个菌落，最好采用稀释涂布平板法。

（3）在实验中，为了防止杂菌污染，对培养基、培养皿、玻璃棒、试管、锥形瓶、吸管等培养器具要进行灭菌处理，即对①②进行灭菌，瘤胃中的液体是实验材料，不能灭菌。

（4）甲同学培养的菌落较多，可能是取样不同造成的，也可能是培养过程中培养基被污染或操作失误，即①②③会造成菌落数增多。

（5）目的菌中的脲酶能把培养基中的尿素分解成氨，氨可以使培养基中的pH升高，从而是酚红指示剂变红。

（6）分析表格中数据，当稀释倍数为106或105时，菌落数分别是36和248个，为30～300之间。

考点：本题考查微生物的实验室培养的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。