Question

11．牛等反刍动物，具有特殊的器官--瘤胃，在瘤胃中生活着多种厌氧微生物，其中许多微生物以纤维作为碳源．某同学成功地从瘤胃中分离出能够分解纤维素的细菌，其实验流程如下，取样稀释→取稀释液接种至固体培养基培养→初步筛选出目的菌菌落→进一步纯化．请回答下列问题：
（1）富集培养基的成分为5g纤维素粉、1gNaNO₃、1.2gNa₂HPO₄•7H₂O、0.9gKH₂PO₄、0.5gMgSO₄•7H₂O、0.5gKCL、0.5g酵母膏、0.5g水解酪素，用蒸馏水定容到1000mL，按用途划分应属于选择培养基．若要确定该培养基的作用，对照试验的培养基应纤维素粉换成葡萄糖．
（2）鉴定纤维素分解菌的方法是刚果红染色法，原理为刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，接种的方法是稀释涂布平板法．
（3）为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，其测定的方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的葡萄糖进行定量的测定，一般认为纤维素酶至少包括C₁酶、C₂酶葡萄糖苷酶三种组分．

Answer 1

分析 瘤胃中高度缺氧，所以生活在其中的微生物主要是厌氧厌氧型的微生物．筛选纤维素分解菌分解菌需要以纤维素为唯一碳源的选择培养基，微生物接种的方法常用的有平板划线法和稀释涂布平板法．纤维素分解菌的鉴定方法是刚果红染色法．

解答 解：（1）题干所述培养基的配方中的碳源是纤维素粉，只能实现以纤维素为唯一碳源的微生物，所以是选择培养基．要确定该培养基的选择作用，对照试验的培养基应将纤维素粉换成葡萄糖．
（2）鉴定纤维素分解菌的发生刚果红染色法，其原理是刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈．
（3）筛选分离得到的纤维素分解菌还需要进行发酵产纤维素酶的实验，测定的方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的葡萄糖量进行定量的测定．纤维素酶是一种复合酶，主要包括C₁酶、C₂酶和葡萄糖苷酶．
故答案为：
（1）选择   纤维素粉换成葡萄糖
（2）刚果红染色法  刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈    稀释涂布平板法
（3）纤维素酶  葡萄糖   葡萄糖苷酶

点评 本题主要考查纤维素分解菌的筛选及培养过程，意在强化学生对相关知识的识记、理解与运用．