Question

14．乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注．利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：
（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用纤维素酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖．
（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？B、E（多选）
A．酿制果醋的醋酸菌      
B．生长在腐木上的霉菌  
C．制作酸奶的乳酸菌
D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌     
E．反刍动物瘤胃中生存的某些微生物
（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为选择培养基（按功能分），培养基中的碳源为纤维素．
（4）从生物体提取出的酶首先要检测活性的检测，以便更好地将酶用于生产实践．在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用固定化酶（固定化细胞）技术．
（5）发酵阶段需要的菌种是酵母菌，在产生酒精时要控制的必要条件是无氧（密闭、密封）．

Answer 1

分析 1、制备固定化酵母的步骤为酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母菌细胞，其中活化是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态；
2、常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法的过程是：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落．

解答 解：（1）玉米秸杆的细胞壁的主要成分是纤维素，所以其经过预处理后应该选用纤维素酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖．
（2）由于纤维素分解酶存在于分解纤维素的微生物中，故应从富含纤维素的环境中去寻找纤维素分解菌，则应从生长在腐木上的霉菌和反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中提取．
（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所用的培养基为选择培养基，利用的碳源为纤维素．
（4）从纤维素分解菌中提取纤维素酶需要做产纤维素酶发酵葡萄糖的实验进行酶活性的检测．固定化酶（固定化细胞）技术可使酶反复使用，故在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用固定化酶（固定化细胞）技术．
（5）发酵阶段需要的菌种是酵母菌，生产酒精时要控制的必要条件是无氧（密封、密闭）．
故答案为：
（1）纤维素（酶）
（2）B、E
（3）选择培养基     纤维素
（4）活性的检测   固定化酶（固定化细胞）
（5）酵母菌      无氧（密闭、密封）

点评 本题考查了酶的固定化、微生物培养、纤维素分解菌的分离和基因工程，意在考查考生识记所列知识点的能力和分析应用能力，试题难度一般．