Question

15．家蚕细胞具有高效表达目的基因的能力，科研人员将人的干扰素基因导入家蚕细胞并进行大规模培养可以提取干扰素用于自制药．
（1）在人的DNA分子上获取干扰素基因时，要用到限制酶．假设该限制酶能专一性的识别DNA上GAATTC序列，并在某些位点切割某化学键，该化学键的名称是磷酸二酯键．
（2）人的干扰素基因一般来自cDNA文库，其属于部分基因（填“基因组”或“部分基因”）文库．
（3）在此基因工程操作过程中的核心步骤是构建基因表达载体．启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（4）将目的基因导入家蚕细胞的常用方法是显微注射法．
（5）通过PCR技术可大量获取目的基因，PCR技术的原理是DNA复制．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．从分子水平上检测目的基因的方法：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
2、PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）等．

解答 解：（1）限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）人的干扰素基因一般来自cDNA文库，其属于部分基因文库．
（3）基因工程操作过程中的核心步骤是构建基因表达载体．启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（4）将目的基因导入动物细胞的常用方法是显微注射法．
（5）通过PCR技术可大量获取目的基因，PCR技术的原理是DNA复制．
故答案为：
（1）磷酸二酯键
（2）部分基因
（3）构建基因表达载体     首端     RNA聚合酶
（4）显微注射法
（5）DNA复制

点评 本题综合考查基因工程的有关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，识记PCR技术的原理、方法以及条件等，能结合所学的知识准确答题．