Question

【题目】聚乳酸（PLA）/聚己二酸对苯二甲酸丁二酯（PBAT）地膜在农业上有广泛的应用，但若不采取措施处理，容易造成地膜在土壤中大量累积，影响土壤生态环境。现欲从土壤中筛选出PLA/PBAT降解菌，使用的培养基如下：PLA/PBAT 10.0 g·L－1，KH2PO41.0 g·L－1，Na2HPO41.5 g·L－1，NH4Cl 2.0 g·L－1，CaCl2·2H2O 0.1 g·L－1，KCl 0.2 g·L－1，MgSO4·7H2O 0.2 g·L－1，pH7.2～7.4。回答下列问题：

（1）从功能上看，上述培养基属于_________。其中，PLA/PBAT可为微生物的生长提供________，除此之外，微生物生长需要的营养物质还有生长因子、____________。

（2）将土壤配制成菌悬液，取上清液接种于上述培养基中培养至培养基浑浊，该步骤的目的是________________________。

（3）若要制作无菌平板，上述培养基中还需加入____________，对培养基采取的灭菌方法是____________。接种培养后，在培养基上形成的全部菌落不一定是一个种群，其原因是________________________________。

Answer 1

【答案】选择培养基??? 碳源??? 水、氮源、无机盐??? 增加PLA/PBAT降解菌的浓度，以确保能够从样品中分离出所需微生物??? 琼脂??? 高压蒸汽灭菌法??? 土壤中 能够降解PLA/PBAT的微生物可能不止一种（或还有以PLA/PBAT降解产物为碳源的微生物，或自养型微生物）???

【解析】

1、培养基的成分有碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。筛选目的微生物需要在富含目的微生物的环境中取样，用选择培养基进行筛选。

2、灭菌的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。灼烧灭菌适合于接种工具的灭菌，一般来说是在操作过程中金属类的接种工具。干热灭菌适合于玻璃器皿、金属工具的灭菌。高压蒸汽灭菌适合于玻璃器皿、接种工具以及培养基，特别注意培养基的灭菌只能用高压蒸汽灭菌。

3、微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）从功能上看，上述培养基属于选择培养基。PLA/PBAT可为微生物的生长提供碳源，除此之外，微生物生长需要的营养物质还有水、氮源、无机盐、生长因子。

（2）将土壤配制成菌悬液，取上清液接种于上述培养基中培养至培养基浑浊，可以增加PLA/PBAT降解菌的浓度，以确保能够从样品中分离出所需微生物。

（3）若要制作无菌平板，上述培养基还需加入琼脂，对培养基采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。接种培养后，由于土壤中能够降解PLA/PBAT的微生物可能不止一种，或还有其它以PLA/PBAT降解产物为碳源的微生物，或自养型微生物，故它们在培养基上形成的菌落不一定为一个种群。