[题目]人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃.可用来发酵处理秸秆.提高秸秆的营养价值.为了增强发酵效果.研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株.并对其降解纤维素能力进行了研究.请回答下列问题: (1)在样品稀释和涂布平板步骤中.下列选项不需要的是 . ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水 (2)在涂布平板时.滴加到培养基表面的菌悬液� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是 ____ （填序号）。

①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 _________ 。此类细菌没有线粒体，但能进行有氧呼吸的原因是_____。

（3）向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是 _________ 。

（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图）。图中降解圈大小与纤维素酶的 _________ 有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是 _____ （填图中序号）。

（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株 _________ 更适合用于人工瘤胃发酵，理由是 ___________________________ 。

【答案】③ 培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果细菌含有与有氧呼吸有关的酶防止杂菌污染酶的多少和活性 ① J4 发酵过程会产热和产酸，J4 菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高

【解析】

微生物培养的关键是无菌操作，微生物培养过程中除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件，需对培养基和培养皿进行消毒，可以通过稀释涂布平板法或显微镜计数法进行统计计数。

刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌；刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入，若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌。

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，需要使用酒精灯对接种环进行灭菌，对培养皿进行灭菌，用无菌水稀释菌液，不需要使用显微镜。

故选③。

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量过多会在培养基表面出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，所以不能过多；

细菌是原核生物，虽然没有线粒体，但含有与有氧呼吸有关的酶，所以能进行有氧呼吸。

（3）分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净以防止杂菌污染。

（4）在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落，降解圈大小与纤维素酶的多少和活性有关，纤维素酶的量越多，活性越强，分解的纤维素越多，透明降解圈越大，所以图中降解纤维素能力最强的菌株是①。

（5）由于胃部pH值较低，体温在37℃左右，根据题意和图示分析可知，发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高，所以推测菌株J4更适合用于人工瘤胃发酵。

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	时间	浓度（mmol·L-1）
	时间	0	1	2．5	5	10	15
叶绿素含量 mg/g	12	11	13	10	3	2．9	3．01
叶绿素含量 mg/g	24	9．9	12	7	2．85	2．7	2．6
胞间C02浓度μmol/mol	12	210	220	260	250	280	270
胞间C02浓度μmol/mol	24	215	225	240	250	255	260