Question

4．家蚕细胞具有高效表达目的基因的能力，科研人员将人的干扰素基因导入家蚕细胞并进行大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
（1）某限制酶能专一性的识别DNA上GAATTC序列，并在特定位点切割某化学键，该化学键的名称是磷酸二酯键．
（2）人的干扰素鉴因一般来自cDNA文库，其属于部分基因（填“基因组”或“部分基因”）文库．
（3）基因工程操作过程的核心步骤是基因表达载体的构建．启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（4）将目的基因导入家蚕细胞的常用方法是显微注射法．目的基因导入受体细胞后，首先要检车转基因生物（染色体）DNA是否插入了目的基因，这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键．
（5）通过PCR技术可大量获取目的基因，PCR技术的原理是DNA复制．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）限制酶切割的化学键是磷酸二酯键．
（2）cDNA文库属于部分基因文库．
（3）基因工程操作过程的核心步骤是基因表达载体的构建．启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（4）将目的基因导入动物细胞的常用方法是显微注射法．目的基因导入受体细胞后，首先要检车转基因生物（染色体）DNA是否插入了目的基因，这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键．
（5）PCR技术的原理是DNA复制．
故答案为：
（1）磷酸二酯键
（2）部分基因  
（3）基因表达载体的构建   首端    RNA聚合酶
（4）显微注射法   （染色体）DNA是否插入了目的基因    
（5）DNA复制

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．