Question

【题目】下图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述不正确的是（ ）

A. 过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化

B. 过程②用Na+处理可提高转化成功率

C. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K

D. 筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织

Answer 1

【答案】B

【解析】过程①为基因表达载体的构建，为了防止酶切产物自身环化，可用两种限制酶切割目的基因的两端和质粒，A正确；过程②是将构建的基因表达载体导入农杆菌体内，用Ca2+处理可提高转化成功率，B错误；农杆菌属于原核生物，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色，过程③的目的是筛选出成功导入除草剂抗性基因G的愈伤组织（即筛选转化的愈伤组织），表面残留有农杆菌的未转化愈伤组织和成功转化的愈伤组织都含有除草剂抗性基因G，都能在含除草剂的培养基中生长，但表面残留的农杆菌体内的报告基因不能表达，不会出现蓝色，而成功转化的愈伤组织细胞内含有的报告基因则能正确表达，进而出现蓝色，所以筛选转化的愈伤组织，其培养基中应加入除草剂和物质K，最终筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织，C、D正确。