Question

10．根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有黏性末端和平末端．
（2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图：
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同．
（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即大肠杆菌DNA连接酶和T₄DNA连接酶．
（4）反转录作用的模板是mRNA（或RNA），产物是cDNA（或DNA）．若要在体外获得大量反转录产物，常采用PCR技术．
（5）基因工程中除质粒外，噬菌体和动植物病毒也可作为运载体．

Answer 1

分析 基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种．DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶．基因工程常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．

解答 解：（1）经限制性核酸内切酶切割后能形成两种类型的末端，即平末端和黏性末端．
（2）为了便于相连，两种不同限制酶切割之后所产生的黏性末端必须相同．
（3）DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．
（4）反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA，利用PCR技术进行大量扩增．
（5）基因工程常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
故答案为：
（1）黏性末端　平末端　
（2）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同　
（3）大肠杆菌　T₄
（4）mRNA（或RNA）   cDNA（或DNA）   PCR
（5）噬菌体 　动植物病毒

点评 本题考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的工具，只要考生识记基因工程三种工具的相关知识即可，属于考纲识记层次的考查，这需要考生在平行的学习过程中构建相关知识网络结构．