Question

13．已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡．因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力．回答下列问题：
（1）为了获得丙种蛋白质的基因，在己知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙种蛋白质的基因序列，据此可利用化学方法合成目的基因．获得丙种蛋白质的基因还可用基因文库、PCR方法．
（2）在利用上述丙种蛋白质基因和质粒栽体构建重组质粒的过程中，常需使用限制酶和DNA连接酶酶．
（3）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子不含（含有/不含）丙种蛋白质基因．

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定．
2、获得目的基因的方法：①从基因文库中获取  ②利用PCR技术扩增  ③人工合成（化学合成）．
3、基因工程的工具有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体．需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体．

解答 解：（1）在已知蛋白质的氨基酸序列的情况下，可根据氨基酸和密码子的对应关系，推出合成该蛋白质的mRNA序列，依据碱基互补配对原则再推出DNA的碱基序列，用DNA合成仪通过化学方法来合成目的基因．此外也可以从基因文库中获取目的基因，也可通过PCR方法获取目的基因．
（2）构建重组质粒时，需要用同种限制酶将运载体目的基因切开，并用DNA连接酶将目的基因连接到运载体上，从而构建基因表达载体．
（3）直接用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，可在叶片部分细胞中合成丙蛋白，该植株的种子和其他的营养器官均不含有重组质粒，所以不含有丙中蛋白质的基因．
故答案为：
（1）基因    基因文库      PCR 
（2）限制      DNA连接酶   
（3）不含

点评 本题考查基因工程中目的基因的获取、工具酶以及目的基因的检测等相关知识，意在考查考生的识记能力和理解能力，难度不大．