Question

3．（1）腐乳、泡菜等是利用微生物制作的传统发酵食品．
①腐乳是用豆腐发酵制成的，多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是毛霉．
在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该是培养基．
②卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右．
③制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是亚硝酸盐含量低．制备泡菜的盐水应煮沸后冷却使用．冷却后再使用的目的是保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响
（2）研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，并对该菌株进行鉴定．
①为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用平板划线法或稀释涂布平板法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于选择培养基．
②关于制备固体培养基的叙述，错误的是D．
A制作固体培养基时可以加入琼脂
B．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置
C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
D．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
③下表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则不能选择表中的A、B、C培养液．（多选）

培养液	纤维素	纤维素酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgSO4•7H2O	FeSO4
A	25g/L	-	-	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
B	-	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
C	25g/L	1μg/L	-	3g/L	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
D	25g/L	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L

④某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌．若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌．

Answer 1

分析 1、腐乳的制作原理：
（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型．
（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸．
2、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
3、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

解答 解：（1）①腐乳是用豆腐发酵制成的，多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是毛霉．在腐乳的制作过程中，豆腐相当于培养微生物的培养基．
②卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，卤汤中的酒的含量一般控制在12%左右，因为酒精含量低时不足以杀菌，含量高时会延长腐乳成熟的时间．
③制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是亚硝酸盐含量低．制备泡菜的盐水应煮沸后冷却使用，目的是保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响．
（2）①纯化微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法；为了获得能合成纤维素酶的菌株MC-1，应该用选择培养基．
②A．制作固体培养基时可以加入凝固剂--琼脂，A正确；
B．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置，B正确；
C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板，C正确；
D．操作的顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，D错误．
故选：D．
③分析题干信息可知，该实验的目的是菌株MC-1中纤维素酶的活力，因此所用的培养基应该是纤维素作为唯一碳源的培养基，且培养基的基本成分应包括碳源，氮源、水和无机盐，分析性表格中的培养基的成分可知，A培养基缺乏氮源，微生物不能生长；B没有碳源，微生物应为无法生长，C不是以纤维素为唯一碳源，牛肉膏也可以作为碳源，因此A、B、C不能用于对MC-1中纤维素酶的活力进行测定的培养基．
④在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌．
故答案为：
（1）①毛霉    培养基    ②12%    ③亚硝酸盐含量低    保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响
（2）①平板划线法或稀释涂布平板      选择    ②D    ③A、B、C     ④酚红    刚果红

点评 本题考查腐乳的制作、微生物的分离和培养，要求考生识记参与腐乳制作的微生物及其代谢类型，掌握腐乳制作的原理及条件；识记分离微生物的两种常用方法，能结合题中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．