[题目]MseⅠ.PstⅠ.EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是GAAT↓TAATTC.C↓TGCAG.G↓AATTC.如图1.图2中箭头表示相关限制酶的酶切点.图3表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径.图4表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径.请据图回答问题.(1)若要用如图1和图2中的质粒和外源DNA构建重组质粒.需要对质粒进行改造.构建新的� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC，如图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切点。图3表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径。图4表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。请据图回答问题。

（1）若要用如图1和图2中的质粒和外源DNA构建重组质粒，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点。在构建新的限制酶切位点的过程中需要使用哪些工具酶___________________。

（2）图3中催化过程①的DNA连接酶的作用是促使形成_________________，导入受体细胞B常用方法_______________，④过程也可以培养到______________，再从培养液中提取。导入受体细胞C首先使用Ca2+处理使其吸收周围的DNA分子，之后将细胞C与图中M溶于_____________________中，完成转化过程。

（3）获得动物1的受体细胞通常是受精卵，哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程中，注射促性腺激素后还需_______________的诱导下才能完成。动物2体内各体细胞的基因种类________________。上述动物的获得均需运用_________________________技术。

（4）干细胞科技发展至今，已进入以脐带、胎盘等组织为主要干细胞来源的全新时代。目前国内干细胞临床研究超过半数采用脐带或胎盘干细胞。胎盘干细胞由囊胚的________________细胞发育而来，利用胎盘干细胞具有发育全能性的特点，所以临床上可以用于__________________，从而挽救器官衰竭的患者的生命。

【答案】限制酶EcoRⅠ、DNA聚合酶、DNA连接酶磷酸二酯键农杆菌转化法愈伤组织缓冲液精子不相同胚胎移植滋养层器官移植

【解析】

分析题图：图1质粒中含有限制酶PstⅠ和EcoRⅠ的切割位点，图2含目的基因的外源DNA中含有限制酶PstⅠ、MseⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中EcoRⅠ酶的切割位点位于目的基因中。

（1）质粒只有EcoR I酶和Pst I酶的识别位点，外源DNA分子含有Mse I酶、EcoR I酶和Pst I酶识别位点，且切割获得目的基因需要Mse I酶和Pst I酶，对质粒改造使，需构建新的限制酶酶切位点；首先用EcoRⅠ处理质粒；然后用DNA聚合酶处理质粒，使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸；再用DNA连接酶处理质粒，形成了的限制酶酶切割位点，这样它可被MetⅠ识别。

（2）催化过程①的DNA连接酶的作用是促使磷酸二酯键的形成；将目的基因导入受体细胞B（植物细胞）的常用方法是农杆菌转化法；④过程也可以培养到愈伤组织后再从培养液中提取产物；导入受体细胞C）需要用Ca2+处理使大肠杆菌处于感受态，之后将细胞C与图中M溶于缓冲液中，完成转化过程。

（3）使成熟卵子形成的过程是在受精过程中完成的，因此细胞只有在精子的作用下才能形成成熟卵子；动物2是由注入体细胞（含目的基因）的囊胚发育而来的，该动物含有目的基因的体细胞与其他体细胞的基因种类不同；上述动物的获得均需运用胚胎移植技术。

（4）胎盘干细胞可来源于囊胚的滋养层；由于胎盘干细胞具有发育的全能性，所以临床上可以用于器官移植，从而挽救器官衰竭的患者的生命。

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