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    12．白血病是由于造血干细胞增殖分化异常而引起的恶性增殖性疾病．目前治疗白血病的主要方法是骨髓移植，但骨髓配型的成功率较低，大大限制了白血病的治疗．随着基因工程的日渐兴起，迎来了基因治疗白血病的曙光．请回答下列相关问题：
    （1）骨髓移植必须进行骨髓配型实验，原因是防止发生过强的免疫排斥反应．目前，临床上通常通过使用免疫抑制剂来提高造血干细胞移植的成活率．
    （2）造血干细胞移植之前先要进行培养．动物细胞培养一般分为原代培养和传代培养两个阶段．对于培养的环境条件，除需要适宜的温度、无菌无毒等以外，还要向培养液中通人氧气和二氧化碳，通人氧气的目的是保证细胞能够进行有氧呼吸，通人二氧化碳的目的是维持培养液的pH；对子所用的培养液，应定期更换，其目的是清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害．
    （3）在进行细胞移植前，有时需对移植的细胞进行基因改造．要了解基因改造是否成功，可在分子水平上检测是否翻译成了相应的蛋白质，常用的方法是抗原一抗体杂交法．
    （4）上述使用的正常细胞，通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型．
    （5）哺乳动物的胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，可以在体外被诱导分化形成新的组织细胞，这使科学家进一步培育人造骨髓成为可能．

    分析 1、原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞．初次培养称为原代细胞培养．
    2、传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养．
    3、动物细胞培养条件：
    （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
    （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
    （3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
    （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）．
    4、胚胎干细胞
    （1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来．
    （2）具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞．另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造．
    （3）胚胎干细胞的主要用途是：
    ①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；
    ②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；
    ③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；
    ④利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；
    ⑤随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题．

    解答 解：（1）骨髓移植必须进行骨髓配型实验，原因是防止发生过强的免疫排斥反应．目前，临床上通常通过使用免疫抑制剂来提高造血干细胞移植的成活率．
    （2）动物细胞培养一般分为原代培养和传代培养两个阶段．对于培养的环境条件，除需要适宜的温度、无菌无毒等以外，还要向培养液中通人氧气和二氧化碳，通人氧气的目的是保证细胞能够进行有氧呼吸，通人二氧化碳的目的是维持培养液的pH；对子所用的培养液，应定期更换，其目的是清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害．
    （3）在分子水平上检测是否翻译成了相应的蛋白质，常用抗原一抗体杂交法．
    （4）上述使用的正常细胞，通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型．
    （5）哺乳动物的胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，具有发育的全能性，可以在体外被诱导分化形成新的组织细胞，这使科学家进一步培育人造骨髓成为可能．
    故答案为：
    （1）防止发生过强的免疫排斥反应   免疫抑制剂
    （2）原代培养  传代培养   保证细胞能够进行有氧呼吸    维持培养液的pH    清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
    （3）抗原一抗体杂交法
    （4）10
    （5）早期胚胎或原始性腺    分化

    点评 本题考查动物细胞培养、胚胎干细胞等知识，要求考生识记动物细胞培养的类型、条件等基础知识；识记胚胎干细胞的来源、特点及相关应用，能结合所学的知识准确答题．

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    培养基++-+-+
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