Question

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线?图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点?

据图回答:

(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用____________________________

_________________________________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因?筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含_________________________________的培养基上进行?

(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_　　　　　　　 ___　 ___________________(填字母代号)?

A.启动子　　　　　　　 B.tetR

C.复制原点　　　　 D.ampR

(3)过程①可采用的操作方法是_________________________________(填字母代号)?

A.农杆菌转化　　　　 B.大肠杆菌转化

C.显微注射　　　　 D.细胞融合

(4)过程②采用的生物技术是____________________________?

(5)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体?这利用了细胞的_　　　　　　　 ___　 _____________________性?

(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用_________________________________(填字母代号)技术?

A.核酸分子杂交　　　　 B.基因序列分析

C.抗原—抗体杂交　　　　 D.PCR

 

Answer 1

(1)HindⅢ和BamHⅠ 氨苄青霉素 (2)A (3)C (4)胚胎移植技术 (5)全能 (6)C

 

本题综合考查基因工程和胚胎工程的相关知识,同时考查利用所学原理解决实际问题的能力?(1)SamⅠ酶切位点在人乳铁蛋白基因内,如用其酶切载体,则会破坏目的基因,故排除?为防止目的基因和载体自身连接,在利用限制酶进行切割时,两端需要剪切不同的黏性末端,因此需要用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因?因人乳铁蛋白基因插入位置位于四环素抗性基因内,因此该基因不能表达而导致受体细胞无四环素抗性;又因为载体上的氨苄青霉素抗性基因未被破坏,所以受体细胞具有氨苄青霉素抗性,故筛选含有重组载体的大肠杆菌需要在含氨苄青霉素的培养基上进行?(2)启动子位于基因的首端,可驱动基因转录出mRNA,使基因得以表达,故属于调控序列?(3)过程①将目的基因导入到动物的受精卵中,一般采用显微注射法?(4)过程②表示将早期胚胎移入代孕牛体内继续发育,故为胚胎移植技术?(5)早期胚胎分割成几份后,每份经移植和培养后都能形成一个新的个体,利用了细胞的全能性?(6)人乳铁蛋白基因成功表达的标志是产生了人乳铁蛋白,因此可利用抗原—抗体杂交技术检测其是否成功表达?