Question

【题目】人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

（1）htPA基因与载体用_________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用______技术。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过__________，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的__________。

（4）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。

Answer 1

【答案】（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶） DNA分子杂交（或核酸探针） （2）超数排卵 获能（处理） （3）显微注射法 性别鉴定 全能性 （4）htPA（或人组织纤溶酶原激活物）

【解析】（1）htPA基因与载体用同种限制性核酸内切酶切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术。（2）对供体母羊注射促性腺激素可促使其超数排卵。采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性。（4）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA（或人组织纤溶酶原激活物），说明目的基因成功表达。