[题目]抗体是一种由浆细胞分泌.可与相应抗原发生特异性结合反应的球蛋白.下列是通过生物学技术制备抗体的两个途径模式.请回答相关问题:(1)与植物细胞融合相比较.途径1中的过程①特有的诱导方式是用处理.过程②需要经过两次筛选.其最终的目的是 .(2)在途径2中.将mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增被称为RT-PCR技术.RT-PCR� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】抗体是一种由浆细胞分泌，可与相应抗原发生特异性结合反应的球蛋白。下列是通过生物学技术制备抗体的两个途径模式，请回答相关问题：

（1）与植物细胞融合相比较，途径1中的过程①特有的诱导方式是用_______________处理，过程②需要经过两次筛选，其最终的目的是________________。

（2）在途径2中，将mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增被称为RT-PCR技术，RT-PCR过程需要的酶有___________________；利用此技术扩增X基因时，设计两种引物的碱基序列的主要依据是_____________________；同时为了便于扩增后的X基因与质粒连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶酶切位点，主要目的是_________________________。

（3）1991年，英国科学家将人的α1-抗胰蛋白酶基因导入绵羊受精卵中，成功从其中4只转基因母绵羊的乳汁中获得了药用的α1-抗胰蛋白酶。这些药物蛋白质的活性比上述转基因工程菌生产的蛋白质高且稳定，原因是：______________________________。

【答案】灭活的病毒筛选出能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞逆转录酶和Taq酶 X基因两端的部分脱氧核苷酸序列使X基因能定向插入表达载体，减少自连与细菌相比，哺乳动物的乳腺细胞含有内质网和高尔基体等细胞器，可对分泌蛋白质进行修饰、加工

【解析】

据图分析，图示为制备单克隆抗体的两个过程，其中①表示动物细胞融合，即骨髓瘤细胞与细胞A（已经免疫的B淋巴细胞或浆细胞）融合的过程，形成的Y细胞是杂交瘤细胞；②表示动物细胞培养和筛选的过程；③表示从浆细胞中提取mRNA的过程；④表示逆转录形成X基因（控制抗体合成的基因）的过程；⑤构建基因表达载体（结构甲）的过程，⑥表示将基因表达载体导入受体细胞的过程。

（1）途径1中的过程①表示动物细胞融合，与植物细胞融合相比，其特有的诱导方式是用灭活的病毒处理；过程②需要经过两次筛选，最终得到的是能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞。

（2）通过逆转录获得cDNA的过程需要逆转录酶的催化；在利用PCR技术扩增cDNA的过程中，需要用到耐高温的DNA聚合酶，即Taq酶；利用PCR技术扩增X基因时，设计两种引物的碱基序列的主要依据是X基因两端的部分脱氧核苷酸序列；为了便于扩增后的X基因与质粒连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶酶切位点，进而使X基因能定向插入表达载体，并减少自连。

（3）与细菌相比，哺乳动物的乳腺细胞含有内质网和高尔基体等细胞器，可对分泌蛋白质进行修饰、加工，所以利用绵羊受精卵为受体细胞获得的药物蛋白质的活性比上述转基因工程菌生产的蛋白质高且稳定。

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