Question

17．科学家利用土壤农杆菌把编码霍乱毒素的无毒性β链的基因转移到苜蓿细胞，再将其培养成幼苗，食用这种苜蓿后，霍乱毒素β链很快被喉、肠胃等部位的分泌性粘液细胞吸收，刺激特异性抗体的大量产生，使机体获得对霍乱的免疫．其具体过程如下：

（1）构建重组DNA分子常用的工具酶是限制酶和DNA连接酶，基因工程中构建基因表达载体的目的是使目的基因在宿主细胞中稳定的复制并表达．
（2）图中过程②采用的方法是农杆菌转化法，Ti质粒上有一个tms片段能促进生长素的大量合成，在对Ti质粒改造时要将该片段去除，其原因是防止植物（苜蓿）体内生长素浓度过高而抑制植物（苜蓿）生长．
（3）该实验中将农杆菌转入苜蓿细胞的原生质体后，需再生细胞壁，实验室检测原生质体是否再生出细胞壁的方法是将细胞置于高渗溶液中，观察是否发生质壁分离．
（4）霍乱毒素β链能诱导机体产生特异性抗体，机体内能产生特异性抗体的细胞是浆细胞，该细胞在免疫调节中可能由记忆细胞和B细胞增殖分化形成．

Answer 1

分析 分析图解：图示表示利用土壤农杆菌把编码霍乱毒素的无毒性β链的基因转移到苜蓿细胞，获得转基因植株的过程．过程①表示基因表达载体的构建，过程②表示目的基因导入受体细胞，过程③表示目的基因的检测或鉴定．

解答 解：（1）构建重组DNA分子常用的工具酶是限制酶和DNA连接酶，基因工程中构建基因表达载体的目的是使目的基因在宿主细胞中稳定的复制并表达．
（2）分析图解可知，图中过程②采用的方法为农杆菌转化法，Ti质粒上有一个tms片段能促进生长素的大量合成，为了防止植物（苜蓿）体内生长素浓度过高而抑制植物（苜蓿）生长，在对Ti质粒改造时要将该片段去除．
（3）该实验中将农杆菌转入苜蓿细胞的原生质体后，需再生细胞壁，实验室检测原生质体是否再生出细胞壁，可以将细胞置于高渗溶液中，观察是否发生质壁分离，如果发生质壁分离说明新的细胞壁已经形成．
（4）机体内能产生特异性抗体的细胞是浆细胞，该细胞在免疫调节中可能由记忆细胞和B细胞增殖分化形成．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶      使目的基因在宿主细胞中稳定的复制并表达
（2）农杆菌转化法     防止植物（苜蓿）体内生长素浓度过高而抑制植物（苜蓿）生长
（3）将细胞置于高渗溶液中，观察是否发生质壁分离
（4）浆细胞     记忆细胞和B细胞

点评 本题考查了基因工程和人体免疫的有关知识，要求考生能够识记基因工程的操作工具，掌握基因工程的操作步骤，识记体液免疫的过程，明确浆细胞可以由B细胞或记忆细胞两类细胞分化而来．