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4.如图是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图.

(1)如图中过程①的完成采用的方法有:①用聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒,依据的生物学原理 ②细胞膜具有流动性;
(2)过程④要用到的酶有③逆转录酶、DNA聚合酶,过程⑥采用的方法叫 ④感受态法.
如图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶(两种酶切割序列完全不同)切割位点.若用限制酶M和N切割,通过凝胶电泳分离,分析得如表.
分子量(kb)1.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0
酶M+++
酶N++
酶M+酶N+++++
凝胶电泳结果(1kb=1000对碱基,+表示检测到该片段的存在
(3)该质粒长度为 ⑤16kb,在该质粒中,M酶与N酶的切割点分别有 ⑥3、⑦2个.
(4)氨苄青霉素抗性基因的作用是 ⑧作为标记基因(鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因的受体细胞筛选出来).
(5)在表达载体中,启动子的作用是:⑨RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动V1基因的⑩转录.

分析 1、据图分析,细胞A表示效应B细胞,细胞Y表示杂交瘤细胞,结构甲表示基因表达载体,①过程表示动物细胞融合,②过程表示杂交瘤细胞的培养,③过程表示提取信使RNA,④过程表示逆转录,⑤表示基因表达载体的构建,⑥表示导入受体细胞.
2、分析表格和审清题意是解答本题的切入点.题干中提出,mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子,因此限制酶在切割时,用酶M得到3个片段,则有3个切点,用酶N得到2个片段,则有2个切点.

解答 解:(1)上图中过程①过程表示动物细胞融合,采用的方法有:用聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒,依据的生物学原理细胞膜具有流动性.
(2)过程④表示逆转录,需要逆转录酶、DNA聚合酶,过程⑥将目的基因导入微生物采用的方法叫感受态法.
(3)该mtDNA为环状DNA,用酶M得到3个片段,则有3个切点,用酶N得到2个片段,则有2个切点.用酶N切割得到2个片段的长度分别为7和9,则该mtDNA的长度为16Kb.
(4)氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因(鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因的受体细胞筛选出来).
(5)在表达载体中,启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动Ⅵ基因的转录.
故答案为:
(1)①用聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒         ②细胞膜具有流动性
(2)③逆转录酶、DNA聚合酶        ④感受态法
(3)⑤16         ⑥3          ⑦2
(4)⑧作为标记基因(鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因的受体细胞筛选出来)
(5)⑨RNA聚合酶         ⑩转录

点评 本题结合图表,考查单克隆抗体的制备、基因工程的原理及技术,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,掌握各步骤的细节,能结合图中和表中信息准确答题,属于考纲识记和理解层次的考查.

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表1
时间(分)051015202530354045505560
血液中乳酸浓度
(mg/cm3)
555407010080604035252320
表2
赛事(米)最高速度(km/h)赛事中吸收的氧气量(升)赛事中需要的氧气量(升)
100370.510
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1000021.5132150
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