Question

【题目】研究发现，H5亚型禽流感能突破种间屏障感染人类．科研人员针对人流感病毒H3以及禽流感病毒H5进行了相关研究．回答下列问题：
（1）获得禽流感病毒和人流感病毒的RNA，经的作用合成DNA．PCR扩增合成的两种病毒的DNA片段时，所需的关键酶是 ．
（2）研究人员利用p质粒构建p﹣H5/H3共表达的重组质粒（如图），设计思路是：先将H5基因整合到p质粒（仅含有NheⅠ和XhoⅠ酶切位点）上，再将H3基因插入，获得重组质粒．为达到实验目的，需要在目的基因两端引入酶切位点，在H5基因两端需要引入酶切位点．
（3）重组质粒p﹣H5/H3中的启动子是识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA．除图中所示的组成外，重组质粒p﹣H5/H3中还应有等．
（4）研究人员将重组质粒p﹣H5/H3直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达出 ， 不断进行体液免疫和细胞免疫，达到预防的目的．上述研究表明，通过将 ， 可以实现一种基因疫苗预防多种疾病的目的．

Answer 1

【答案】
（1）逆转录酶；热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
（2）NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ
（3）RNA聚合酶；终止子、标记基因
（4）抗原蛋白；多个抗原基因插入同一个质粒中
【解析】解：（1）由RNA合成DNA需要逆转录酶．PCR技术中所需的关键酶是热稳定DNA聚合酶（Taq酶），加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始合成互补链．（2）分析图解可知，步骤中先将H5基因整合到p质粒上，该质粒上仅含有NheⅠ和XhoⅠ酶切位点，即用NheⅠ和XhoⅠ两种酶切割目的基因构建重组质粒；而将H3基因插入，获得重组质粒需要H5基因右端有ClaⅠ酶，因此需要在H5基因两端需要引入NheⅠ、ClaⅠ、XhoⅠ酶切位点．（3）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA．重组质粒由启动子、终止子、目的基因和标记基因组成．（4）将重组质粒p﹣H5/H3直接导入人或动物体内，经过基因表达能够合成抗原蛋白，用于体液免疫和细胞免疫，达到预防的目的．通过将 多个抗原基因插入同一个质粒中，可以实现一种基因疫苗预防多种疾病的目的．
【考点精析】解答此题的关键在于理解基因工程的原理及技术的相关知识，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术．