Question

【题目】某农田中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面流程选育能降解该除草剂的细菌（该除草剂在水中溶解度低，培养基不透明）。

（1） 在筛选目的菌过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__为唯一氮源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于__培养基。

（2）在划线培养前，接种环应该在酒精灯火焰上__；在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步__。

（3）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是__，有透明带菌落利用的氮源主要是__，据此可筛选出目的菌。实验结果如乙图显示的A～E五种菌株中，__是最理想菌株。

（4）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有__mL无菌水的试管中，再稀释103倍。各取0.1mL已稀释的上述水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为__。

Answer 1

【答案】该除草剂 选择 灼烧灭菌 稀释以获得单个菌落 氮气 该除草剂 E 9 5.6×109

【解析】

虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

（1）据分析可知，在筛选目的菌过程中，应将土壤样品稀释液接种于以该除草剂为唯一氮源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于选择培养基。

（2）在划线培养前，接种环应该在酒精灯火焰上灼烧灭菌；在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释以获得单个菌落，便于观察和鉴别。

（3）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是氮气，有透明带菌落利用的氮源主要是该除草剂，据此可筛选出目的菌。实验结果如乙图显示的A～E五种菌株中，E是最理想菌株，因为其产生的透明圈的直径最大。

（4）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有10mL无菌水的试管中，再稀释103倍。各取0.1mL已稀释的上述水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为10×103×（0.1×10-3）×（55+56+57）/3=5.6×109。