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    【题目】大肠杆菌的数量是检测自来水是否受污染的最直接的指标。根据所学知识回答下列问题：

    （1）要从自来水中分离和纯化大肠杆菌，所需培养基一般为_______________________。制备培养基时在各成分都溶化后，要进行调节pH和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是____________________________，灭菌后还要进行__________________。

    （2）除了通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目外，还可以通过___________对大肠杆菌进行活菌数目的统计。大肠杆菌的培养基中需要加入_________________溶液，则形成的菌落呈________色。

    （3）研究表明大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质，分离提取部分大肠杆菌蛋白质时，需利用________________法，并加入磷酸缓冲液进行洗脱，最先洗脱出来的蛋白质相对分子质量较________。

    【答案】固体培养基 高压蒸汽灭菌 倒平板 稀释涂布平板法 伊红美蓝（“伊红—美蓝”或“伊红溶液和美蓝溶液”亦可） 黑 凝胶色谱（或“分配色谱”） 大

    【解析】

    分离和纯化大肠杆菌时，一般用固体培养基，培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝发生特定的颜色反应，使菌落呈黑色。以此相关知识解答。

    （1）分离和纯化微生物所用的培养基为固体培养基，培养基的制作过程主要有计算、称量、溶化、调节pH、灭菌、倒平板，培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

    （2）除通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目，还可以通过稀释涂布平板法对大肠杆菌进行活菌数目的统计。大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝发生特定的颜色反应，使菌落呈黑色。

    （3）分离提取部分大肠杆菌蛋白质时，需利用凝胶色谱法，加入磷酸缓冲液进行洗脱，蛋白质相对分子质量较大的最先洗脱出来。

    练习册系列答案
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