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    16．根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
    （1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有平末端和黏性末端．
    （2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即T4DNA连接酶和E•coliDNA连接酶．
    （3）逆转录作用的模板是mRNA（或RNA），产物是cDNA．
    （4）基因工程中除质粒外，动植物病毒和λ噬菌体的衍生物也可作为运载体．
    （5）理论上，基因组文库含有生物的全部基因；而cDNA文库中含有生物的部分基因．基因组文库构建过程中将目的基因与载体连接，最常用的载体的基本组成单位为脱氧核苷酸．
    （6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱．

    分析 1、基因工程的工具：
    （1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
    （2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
    （3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
    2、基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有平末端和黏性末端．
    （2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即T4DNA连接酶和E•coliDNA连接酶．
    （3）逆转录是指以mRNA为模板合成cDNA的过程，因此逆转录作用的模板是mRNA（或RNA），产物是cDNA．
    （4）基因工程常用的运载体有：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
    （5）理论上，基因组文库含有生物的全部基因；而cDNA文库中含有生物的部分基因．基因组文库构建过程中将目的基因与载体连接，最常用的载体是质粒，其化学本质是DNA，因此其基本组成单位为脱氧核苷酸．
    （6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱．
    故答案为：
    （1）平末端    黏性末端  
    （2）T4　　E•coli　
    （3）mRNA（或RNA）　cDNA
    （4）动植物病毒 　 λ噬菌体的衍生物　
    （5）全部    部分     脱氧核苷酸
    （6）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱

    点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及操作步骤，掌握各操作工具的作用及各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    ♂
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    YRYYRRYyRR⑤YyRr
    yRYyRRyyRRYyRr④
    ②YYRr③YYrrYyrr
    yrYyRryyRrYyrryyrr
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    B．③的表现型与⑤相同
    C．表现型与F1相同的个体在F2中占$\frac{9}{16}$
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    C．进化过程中炭疽杆菌产生的定向变异
    D．进化过程中炭疽杆菌通过DNA复制，变异逐代积累

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