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    12．天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用．研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精．请回答下列问题：
    （1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是限制性核酸内切酶，用DNA连接酶将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，此表达载体除目的基因外，必须含有启动子、终止子和标记基因．
    （2）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法DNA分子杂交技术，该项方法要用用放射性同位素进行标记了的含目的基因的DNA片断作探针进行检测；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用抗原-抗体杂交法（或淀粉酶活性）方法检测．
    （3）采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增．该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种dNTP、模板DNA、引物和Taq酶（耐高温的或热稳定的DNA聚合酶）．其中引物有2种，实质是DNA，假如引物都用3H标记，从理论上计算循环4次，所得DNA分子中含有3H标记的占100%．
    （4）已知BarnHⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后或序列明显增多．

    分析 1、基因工程操作的工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体；
    2、基因工程操作的步骤为提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达．
    3、目的基因的检测有多种手段，如①DNA分子杂交技术；②分子杂交技术；③抗原-抗体杂交技术．

    解答 解：：（1）将目的基因（淀粉酶基因）切割下来所用的工具是限制酶，将淀粉酶基因和运载体连接起来需要DNA连接酶，之后将重组DNA分子导入受体细胞，以完成工程菌的构建．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
    （2）检测目的基因是否导入受体细胞，可采用DNA分子杂交技术，该项方法要用用放射性同位素进行标记了的含目的基因的DNA片断作探针进行检测；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用抗原-抗体杂交法（或淀粉酶活性）方法检测．
    （3）采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增．该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种dNTP、模板DNA、引物和Taq酶（耐高温的或热稳定的DNA聚合酶）．PCR技术过程中，两条链作为模板过程中都需要引物，由于两条链首端的碱基序列不同，因此引物有2种，实质是DNA片段，假如引物都用3H标记，由于每次合成都需要引物，所以从理论上计算循环4次所得DNA分子中都含有3H．
    （4）巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点如图2所示．用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后或序列明显增多．
    故答案为：
    （1）限制性核酸内切酶    DNA连接酶    启动子     终止子
    （2）DNA分子杂交技术    用放射性同位素进行标记了的含目的基因的DNA片断    抗原-抗体杂交法（或淀粉酶活性）
    （3）Taq酶（耐高温的或热稳定的DNA聚合酶）    2    DNA     100%
    （4）或

    点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的工具和操作步骤，能应用基因工程技术培育获得的酿酒酵母工程菌，属于考纲识记和理解层次的考查，这类试题需要考生在平时的学习过程中学会构建知识网络结构．

    练习册系列答案
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    A．叶绿体的外膜上

    B．叶绿体类囊体膜上

    C．叶绿体的内膜上

    D．叶绿体的基质中

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    6．将含有1对同源染色体、其DNA分子都已用32P标记的精原细胞，在只供给含31P的原料中先进行一次有丝分裂，产生的两个子细胞再各自进行减数分裂．则最终所产生的八个精子中，被32P标记的精子数可能有几个（　　）
    A．2或4个B．2、4或6个C．4、6或8个D．4个

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    20．19世纪，两位德国科学家施莱登和施旺提出了细胞学说，该学说最核心的内容是（　　）
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    B．一切生物都是由细胞构成的，细胞是生命的最基本单位
    C．所有老细胞都可以通过分裂产生新细胞
    D．一切动物、植物都是由细胞构成的，细胞是动、植物的基本单位

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    （1）2013年8月18日，中国“神舟”十号飞船搭载的“大红袍1号”和“正山小种1号”等茶种顺利移交给武夷山茶叶育种基地的科研人员，进入了基地的培育与筛种阶段．这是利用太空条件使相关茶种发生了基因突变（填变异类型），进而选育出品优或量高的新品种．但实际培育过程中，会出现处理过的种子有的出苗后不久就死亡，绝大多数的产量和品质下降等情况，这说明了基因突变对大多数个体来说是有害的．在其中也发现了极少数的个体品质好、产量高，这说明了变异是不定向的．
    （2）如图甲表示镰刀型细胞贫血症的发病机理，该病发病的根本原因是DNA复制时，其中的一个碱基对（T-A）被另一个碱基对（A-T）所替代，转运缬氨酸的tRNA一端裸露的三个碱基应该是CAU．
    （3）某动物的基因型为AABb，该动物体的一个体细胞有丝分裂过程中一条染色体上的基因如图乙，则两条姐妹染色单体上的基因不同的原因是发生了基因突变．
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    17．下列有关遗传基本概念的叙述中，正确的是（　　）
    A．相对性状指同一种生物的同一种性状的不同表现类型，如棉花的细绒与长绒
    B．性状分离指在杂种后代中出现不同基因型个体的现象
    C．等位基因指位于同源染色体同一位置上控制相对性状的基因
    D．表现型是指生物个体表现出来的性状，基因型相同，表现型一定相同

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    B．碳元素在①、②、③、④间以含碳有机物的形式传递
    C．①代表生产者，5可以代表化能合成作用
    D．①、②、③中含有的有机物可以作为动力来促进碳元素在群落和环境之间循环

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    2．图为生物体内葡萄糖分解代谢过程的图解和随氧浓度变化气体交换速率图解．请根据图回答下面的问题

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