科目:高中生物 来源:江苏省盐城中学2011-2012学年高二下学期期中考试生物试题 题型:013
在利用PCR技术扩增目的基因的过程中,不需要的条件是
A.引物
B.模板DNA
C.核糖核苷酸
D.热稳定DNA聚合酶
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科目:高中生物 来源:2012届天津市天津一中高三入学摸底考试 生物试卷 题型:综合题
请回答基因工程方面的有关问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。 图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为 。
②在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。
①第1组:引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效; ②第2组: 。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为 。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对),请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。
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科目:高中生物 来源:2012-2013学年江苏省高三高考最后一卷生物试卷 题型:综合题
ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下:
第①步:用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。
第②步:将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。
第③步:将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除,用一段红霉素抗性基因取代之,得到重组质粒2。
第④步:将重组质粒2导入蓝藻细胞,由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同,所以能准确地与其发生同源重组,产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料,回答下列问题:
(1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶? 。
PCR扩增DNA时必须加入引物,其作用是 。
(2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环,每次循环都要经过三个步骤,其中“复性”这一步骤发生的变化是 。
(3)构建重组质粒1、2时,为保证成功率,往往使用 酶对基 因和质粒进行切割,以切出相同的黏性末端,便于连接。此酶的作用是将DNA分子的 键打开。
(4)质粒是基因工程中最常用的运载体,其化学本质是 ,此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
(5)导入重组质粒2以后,往往还需要进行检测和筛选,可用 制成探针,检测是否导入了重组基因,在培养基中加入 可将变异株细胞筛选出来。
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科目:高中生物 来源:2011-2012学年安徽省高三上学期期中考试生物试卷 题型:综合题
(10分)请回答基因工程方面的有关问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。 图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测,第四轮循环产物中只含有引物A,不含有引物B的DNA片段所占的比例为______。
②至少完成_____轮循环,才能获得两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物(只标注了部分碱基序列)是不符合要求的(如下图),请说明理由____________________________________________。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的 功能,这是因为________________________________________。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对),请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。
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