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    【生物—生物技术实践】（本题共15分）

    多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图22 回答：

    （1）（每空2分）提取目的基因

      ①若已获取PG的mRNA，可通过                 获取PG基因。

    ②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有         结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

    ③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是                                。

    （2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有           的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入                       。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞                   现象来鉴别细胞壁是否再生。

    （3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与                         互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄        ，则可确定转基因番茄成功。

    （4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用      方法使子代保持转基因的优良性状。

    （1）（每空2分）（1）①逆转录（或cDNA文库）②RNA聚合酶

    ③大量复制目的基因（克隆目的基因）

    （2）卡那霉素 ；植物激素（生长素和细胞分裂素）是否发生质壁分离

    （3）天然PG基因转录的mRNA ；长

    （4）（2分）植物组织培养

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【生物——生物技术实践】如图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答：

    (1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是                          。

    (2)制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为                  ，盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是                                          。

    (3)泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因：

                                                                                 

    (4)测定亚硝酸盐含量的方法是 

                                                。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    34．（8分）【生物——生物技术实践】

    请回答下列生物技术方面的问题：

      （1）测定亚硝酸盐含量的操作程序是：①配制溶液；②________________；③________________；④比色。泡菜发酵过程中产生的亚硝酸盐在盐酸酸化条件下，与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶联成________________色化合物。

      （2）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是________________；实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后再倒掉，这样做是为了________________。

      （3）研究发现，固定化强度强的酵母颗粒发酵效果好，且稳定性高、使用寿命长。某机构利用上述装置，将2％、2.5％、3％的海藻酸钠分别利用2%、3%、4%的X溶液进行凝胶化处理，所得到的固定化酵母颗粒的强度及在28℃下发酵48h后的酒精产量见下表：

    由表格内容可以看出，随着X溶液浓度的增加，________________增加；凝胶固定化效果较好和酒精产量较大的海藻酸钠与X溶液浓度分别是________________、________________。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    34．(8分)【生物—生物技术实践】

    　 微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：

    (1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自 ___________　的土壤。

    (2)为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用 ___________ 培养基。常用的接种方法 ___________　和 　　　　　　　。

    (3)接种后，应密封培养的原因是___________ ，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取___________ 就可获得高效菌株。

    (4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0．2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为 ___________　个/mL。该统计结果 ___________ (低于、高于)实际值。

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    科目：高中生物 来源：2012届山东省青岛市高三统一质量检测理科综合（生物部分） 题型：综合题

    （8分）【生物—生物技术实践】
    传统生物技术与我们的生活非常贴近，现代生物技术也正给人类生活带来巨大变化。请回答下列有关现代生物技术实践的问题：
    （1）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是      ；实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后才能倒掉，这样做是为了_______________________ 。
    （2）月季的花药培养一般选择       期花药培养成功率最高。
    （3）水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，其中的       法对于提取柠檬芳香油不适应，原因是_________________________；用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率主要取决于________________，提取的胡萝卜素粗品可通过        法进行鉴定。

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    科目：高中生物 来源：2010年高考生物试题分项解析之专题十四 生物技术实践 题型：综合题

    【生物—生物技术实践】
    生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。

    （1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
    （2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。
    （3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
    （4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。

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