【题目】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有__________、__________个游离的磷酸基团。
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越_________。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，________(填“能”或“不能,使用SmaⅠ切割，因为________。
（4）与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_________________。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_____________酶。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_____________________。
（7）cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备cDNA探针时，首先需提取、分离获得__________作为模板，在___________的催化下合成cDNA探针。
【答案】 0 2 高 不能 SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 DNA连接 鉴别和筛选含有目的基因的细胞 mRNA 逆转录酶
【解析】试题分析：本题考查基因工程，考查对基因工程的工具、步骤的理解和应用。解答此类题目，应根据题图明确不同限制酶的切割位点，根据基因工程的操作要求选择合适的限制酶。
（1）质粒为环状DNA，没有游离的磷酸基团；图1所示的质粒分子含有1个SmaⅠ酶切位点，切割后形成1个链状DNA，含有2个游离的磷酸基团。
（2）SmaⅠ酶切位点含有G—C碱基对，含氢键数目较多，对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能用SmaⅠ切割，因为SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因。
（4）使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA，质粒和目的基因两端均含有不同的黏性末端，可以防止质粒和目的基因的自身环化。
（5）切割后的质粒与目的基因片段混合，加入DNA连接酶，可形成重组质粒。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因作为标记基因，可用于鉴别和筛选含有目的基因的细胞。
（7）制备cDNA探针时，首先需提取、分离获得mRNA作为模板，在逆转录酶的催化下合成cDNA探针。
世纪百通期末金卷系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】胰岛细胞中与胰岛素形成和分泌有关的结构是（ ）
A.线粒体、中心体、高尔基体、内质网、细胞膜
B.内质网、核糖体、叶绿体、高尔基体、细胞膜
C.内质网、核糖体、高尔基体、线粒体、细胞膜
D.细胞膜、内质网、核糖体、高尔基体、中心体
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
A.DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来
B.目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变
C.目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外
D.常使用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】假说—演绎法的一般程序是( )
A. 个案研究—发现问题—提出假设—归纳综合
B. 个案研究—综合比较—提出假设—归纳结论
C. 发现问题、分析问题—提出假设、设计实验—观察实验、验证假说—归纳综合、总结规律
D. 观察实验、发现问题—分析问题、提出假设—设计实验、验证假说—归纳综合、总结规律
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】如图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：
(1)构建表达载体需要的酶是：__________________________________，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、_______、_____________、终止子和复制原点等。
(2)图中载体上的Neo基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是一种抗生素(对细胞有毒害作用)，添加G418的目的是______________________。
(3)图中所用的胚胎干细胞来自___________________________。
(4)图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的________位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素处理，目的是________。
(5)可以使用________方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】鸟的性别决定方式为ZW型，某种鸟尾部羽毛颜色由位于常染色体上的一组复等位基因A、a1、a2控制，使其分别有白色、灰色、褐色、棕色四种羽色，其生化机制如下图所示。回答下列问题：
（1）该种鸟尾羽颜色的基因型共有___________种。
（2）—只白色雄鸟与多只棕色雌鸟交配产生的后代分别有三种羽色，则该白色雄鸟的基因型为_______。
（3）若该种鸟的一种显性性状由基因B控制，但不知基因B位于何种染色体上，某生物兴趣小组制订了一个调查方案，对此进行研究，请对该方案进行相关补充。
调查方案：寻找具有此显性性状的该鸟种群，统计___________的个体数量。
预期结果：
①若具有该显性性状的雄鸟和雌鸟个体数量大致相等，则B基因位于常染色体上。
②若具有该显性性状的____________________，则B基因位于Z染色体上。
③若具有该显性性状的____________________，则B基因位于W染色体上。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】请根据下图回答有关问题：
（1）在上图所示的蛋白质工程流程中，A是___________，过程③所必需的酶是___________。
（2）对获得的目的基因可采用_______技术以扩增其数量，在该过程中所用的酶的最大特点是_________。
（3）—个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还需要_________。过程⑤中将构建的基因表达载体导入受精卵常用的方法是_________；配制受精卵培养液时，通入一定浓度二氧化碳的目的是__________。
（4）过程⑥中通常将发育至___________阶段的早期胚胎转移至受体子宫内培育。
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