Question

【题目】细胞融合技术是细胞工程中的一门非常重要的技术，该技术能够按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品，作为科学研究的一种手段，在细胞工程中有着非常广泛的应用。据图回答下列问题：

（1）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，ab细胞融合之前，要用到的酶是_____________，处理后得到____________。接着可用化学诱导剂____________诱导融合，融合成功的标志是____________，这些融合细胞经过脱分化形成____________。

（2）若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞。将其融合获得 ____________（答出两个特点）的d杂交瘤细胞进行____________培养和抗体检测以后，再经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。利用灭活的病毒可以诱导产生d细胞，其中的灭活是指________________________。

Answer 1

【答案】纤维素酶和果胶酶 原生质体 PEG（聚乙二醇） 杂种细胞再生出细胞壁 愈伤组织 既能产生特异性抗体，又能无限增殖 克隆化 利用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构

【解析】

1、植物体细胞杂交过程：（1）表示制备原生质体。去除细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；（2）诱导植物原生质体融合。方法为：物理法：离心、振动、电激，化学法：聚乙二醇（PEG）；（3）杂种细胞的筛选。细胞融合形成杂种细胞，完成的标志：再生出新的细胞壁；（4）杂种植株的培养和鉴定，过程包括脱分化和再分化过程。

2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（1）若a、b是番茄和马铃薯两种植物的体细胞植物，植物体细胞杂交前，先采用酶解法去除细胞壁，即采用纤维素酶、果胶酶处理除去细胞壁获得原生质体；诱导原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）；原生质体融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁。融合细胞经脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。

（2）若利用动物细胞融合技术来生产单克隆抗体，应将经免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，仅考虑两两融合，则融合的细胞C有3种，融合后需经多次筛选，以得到既能产特异性抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞d。该过程中第一次筛选一般利用选择培养基进行，第二次筛选需对细胞进行反复的克隆化培养和抗体阳性检验，以便获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞进行体内或体外扩大培养。诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）。“灭活”是指利用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。