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1.纤维素酶是将纤维素水解成葡萄糖的一种复合酶,在生物燃料制作、布料处理中起重要作用.图示纤维素酶的相关提取过程,请回答:

(1)从土壤中获取纤维素分解菌时,应选择富含纤维素的环境采集土样.
(2)筛选纤维素分解菌,可采用刚果红染色法.下列关于该培养基制备的叙述错误的有BC(双选)
A.配制固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂
B.平板冷凝后需倒置的原因是让培养皿盖上的冷凝水充分落入培养基
C.操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
D.培养基中能够为菌体的生长提供碳源的是淀粉和纤维素粉
(3)实验时,加入染色剂的方法有两种,方法一是先培养微生物,再加入染色剂,方法二是在倒平板时就加入染色剂.两种方法中会出现“假阳性反应”的是方法二.
(4)在对纤维素分解菌进行计数时,为选出菌落数符合要求的平板,常需要在涂布前用无菌水对样品进行稀释.若培养基被杂菌污染,通常会导致统计结果比实际数目高(填“高”或“低”),为检测培养基是否被污染,可对其进行空白培养.

分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:
(1)计算:依据是培养基配方的比例.
(2)称量:牛肉膏比较黏稠,可同称量纸一块称取.牛肉膏和蛋白胨易吸潮,称取时动作要迅速,称后及时盖上瓶盖.
(3)溶化:牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂(注意:要不断用玻璃棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)→补加蒸馏水至100mL.
(4)调pH;
(5)灭菌:培养基采用高压蒸汽灭菌,培养皿采用干热灭菌.
(6)倒平板.
2、分解纤维素的微生物的分离实验的原理:
①土壤中存在着大量纤维素分解酶,包括真菌、细菌和放线菌等,它们可以产生纤维素酶.纤维素酶是一种复合酶,可以把纤维素分解为纤维二糖,进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用,故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中,纤维素分解菌能够很好地生长,其他微生物则不能生长.
②在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌.

解答 解:(1)筛选纤维素分解菌时土壤取样需要到富含纤维素的环境中取样.
(2)筛选纤维素分解菌,可采用刚果红染色法,其原理是:在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌.
A、配制固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂,A正确;
B、平板冷凝后需倒置的原因是不让培养皿盖上的冷凝水落入培养基,防止造成污染,B错误;
C、操作的顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,C错误;
D、培养基中能够为菌体的生长提供碳源的是淀粉和纤维素粉,D正确.
故选:BC.
(3)实验时,加入染色剂的方法有两种,方法一是先培养微生物,再加入染色剂,方法二是在倒平板时就加入染色剂.第一种方法会使菌落之间发生混杂,第二种方法:产生淀粉酶的微生物也产生模糊的透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈.因此,两种方法中会出现“假阳性反应”的是方法二.
(4)在对纤维素分解菌进行计数时,为选出菌落数符合要求的平板,常需要在涂布前用无菌水对样品进行稀释;若培养基被杂菌污染,通常会导致统计结果比实际数目高;为检测培养基是否被污染,可对其进行空白培养.
故答案为:
(1)富含纤维素
(2)刚果红染色     BC
(3)倒平板         方法二
(4)无菌水         高            空白培养

点评 本题结合图示主要考查微生物的筛选、培养、鉴定等知识,要求考生识记纤维素分解菌分离实验的原理;识记制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤;识记微生物计数等知识,能结合所学的知识准确答题.

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