Question

4．培养基的配制广泛应用于微生物培养、植物组织培养等技术中．如表为某微生物培养基的配方，请回答相关问题：

成分	含量	成分	含量
Na2HPO4	2.1g	尿素	1.0g
KH2PO4	1.4g	C6 H12 O6	10.0g
MgSO4•7H2O	0.2g	琼脂	15.0g
NH4NO3	0.3g	H2 O	1 000mL

（1）该培养基按物理性质分属于固体培养基．对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．
（2）如果用该培养基分离土壤中分解尿素的细菌，应除去的物质是NH₄NO₃．除去该物质后，只有能合成脲酶的微生物才能生长，这种培养基称为选择培养基．
（3）在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格，采取的措施是设置未接种的空白培养基在相同的条件下培养，如果空白培养基上没有长出菌落，说明培养基制备成功，否则需要重新制备．
（4）一般采用稀释涂布平板法分离尿素分解菌，其实验操作规范，结果发现培养基上细菌数目过多，连成一片．请提出合理的改进措施：增大菌液的稀释倍数．

Answer 1

分析 1、培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质．营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水．根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基．根据性质分为液体、半固体和固体培养基．
2、防止杂菌污染时贯穿实验整个过程，如对环境、生物材料、操作者双手等进行消毒，对培养基、接种环和培养仪器进行灭菌．
3、尿素分解菌体内的脲酶能够把尿素分解为氨使pH升高，与酚红指示剂反应后呈红色．筛选尿素分解菌要使用一尿素为唯一氮源的选择培养基，筛选分离时常用稀释涂布平板法和平板划线法．

解答 解：（1）由于该培养基中加入了凝固剂--琼脂，所以该培养基按物理性质分属于固体培养基．对培养基进行灭菌常用高压蒸汽灭菌法．
（2）分离土壤中分解尿素的细菌时，应该用以尿素为唯一氮源的培养基，因此如果用该培养基分离土壤中分解尿素的细菌，应除去的物质是NH₄NO₃．除去该物质后，只有能合成脲酶的微生物才能生长，这种培养基称为选择培养基．
（3）在培养过程中，可设置未接种的空白培养基在相同的条件下培养，如果空白培养基上没有长出菌落，则说明制备的培养基合格，培养基制备成功．
（4）采用稀释涂布平板法分离尿素分解菌时，如果结果发现培养基上细菌数目过多，连成一片，可增大菌液的稀释倍数．
故答案为：
（1）固体        高压蒸汽灭菌
（2）NH₄NO₃       选择
（3）设置未接种的空白培养基在相同的条件下培养     空白培养基上没有长出菌落
（4）稀释涂布平板法   增大菌液的稀释倍数

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及作用；识记接种微生物常用的两种方法；识记分离土壤中分解尿素的细菌的实验原理，能结合所学的知识准确答题．