Question

【题目】某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、Bam_HI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

（1）在构建重组质粒时，应选用_______和________两种限制酶对_______进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性。

（2）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加__________，理由是_____________。

（3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_____技术，即通过_____和________两个主要过程最终形成完整植株。

Answer 1

【答案】 SalⅠ Hind Ⅲ 质粒和抗盐基因的DNA 氨苄青霉素 重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏 植物组织培养 脱分化 再分化

【解析】试题分析：识记和理解基因工程的基本工具及基因工程的基本操作步骤的相关知识，并形成知识网络，在此基础上，通过提取图中“三种限制酶的位置等信息”并结合题意进行相关试题的解答。

(1)题图显示：SalⅠ、BamHⅠ和HindⅢ这三种限制酶的酶切位点都位于质粒中的抗四环素基因上，用其中任何一种酶切割都会破坏四环素抗性基因；SalⅠ和HindⅢ的酶切位点分别位于目的基因（抗盐基因）的两端，而BamHⅠ的酶切位点位于目的基因中，若用BamHI酶进行酶切，会破坏目的基因的结构，最终得不到转基因抗盐烟草。综上分析，在构建重组质粒时，应选用选用SalⅠ和HindⅢ对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割。

(2) SalⅠ和HindⅢ的酶切位点在抗四环素基因中，所构建的重组质粒中含有的抗氨苄青霉素基因结构完好，而抗四环素基因被破坏，所以为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入氨苄青霉素。

(3) 采用植物组织培养技术可将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株。植物组织培养过程中，主要经过脱分化和再分化形成完整植株。