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【题目】凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。科研人员在实验室中利用初步获得的猪红细胞液体进行血红蛋白(相对分子质量约为64000)的提取、分离和鉴定实验,请回答下列问题:

1)将初步获得的红细胞洗涤好后加入____________,经搅拌、离心、分层后分出血红蛋白溶液,再装入____________12小时,即完成粗分离。

2)粗分离的血红蛋白溶液中含有一些微蛋白(相对分子质量约为11800),这两种蛋白质通过凝胶时,____________(填“血红蛋白”或“微蛋白”)移动速度较快,原因是_____________________

3)在纯化洗脱血红蛋白时,需要加入____________(填“磷酸缓冲液”或“生理盐水”),理由是________________________

4)为鉴定血红蛋白的纯度,要利用电泳实现样品中各种分子的分离,常用的两种电泳方法是____________

【答案】蒸馏水和甲苯 透析袋 血红蛋白 血红蛋白相对分子质量较大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动, 路程较短,因此移动速度较快 磷酸缓冲液 保持体外溶液的pH与体内环境中的pH基本-致,维持蛋白质正常结构和功能(或让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其正常结构和功能) 琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳

【解析】

血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品的处理;再经过透析去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化;最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

1)血红蛋白样品处理及粗分离时,为了释放血红蛋白需要加入蒸馏水和40%甲苯,细胞破裂释放血红蛋白,然后离心分层出血红蛋白溶液,最后进行透析。

2)凝胶实际上是一些微小的多孔球体,相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。比较分子量,血红蛋白分子量大于微蛋白,所以血红蛋白移动速度较快。

3)洗脱时需要加入磷酸缓冲液,主要是保持体外溶液的pH与体内环境中的pH基本一致,让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其正常结构和功能。

(4)为鉴定血红蛋白的纯度,要利用电泳实现样品中各种分子的分离,常用的两种电泳方法是:琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。

练习册系列答案
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科目:高中生物 来源: 题型:

【题目】下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是( )。

A. 利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数

B. 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落

C. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌

D. 用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加

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【题目】新型肺炎是由新型冠状病毒(COVID-19)感染导致的,该病目前还没有特效药物,需要通过患者自身免疫力来消灭病毒。COVID-19在人体内的潜伏期一般为3天至7天,最长14天,人体感染该病毒后一般在7天后体内才会出现抗体。检测患者血清中是否存在特异性抗体(需抗体达到一定浓度)可作为COVID-19感染的诊断指标。请回答相关问题:

1COVID-19能成为抗原是由于其表面的_________能引起机体产生特异性免疫反应。当病毒侵入人体后,_________细胞被激活,释放白介素等淋巴因子直接刺激位于_______的体温调节中枢,导致机体发热。

2)新型肺炎常利用特异性抗体进行诊断,其原理是_______________,但该方法不适合对可能处于潜伏期的疑似患者做早期排查,其原因是________________

3)医务人员发现通过核酸检测已确诊感染病毒7天后的患者,多数做抗体检测会出现阳性(表明有相应抗体产生),也有少数患者出现假阴性(检测不到抗体),假阴性出现的原因可能是_______________________

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【题目】中的物质或结构在下列生物中的叙述正确的是( )

核酸 蛋白质 液泡 叶绿体 核膜 细胞膜 细胞壁

A. ①⑥在病毒、大肠杆菌、衣藻和草履虫体内都存在

B. ⑤⑦在大肠杆菌和衣藻体内都存在

C. ①在衣藻体内都存在

D. 外,其余各项在衣藻和蓝藻体内都存在

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【题目】脂质是细胞和生物体的重要组成成分,下列叙述错误的是(

A. 磷脂是构成细胞膜的重要成分

B. 脂肪是细胞内良好的储能物质

C. 维生素D在人体内参与血液中脂质的运输

D. 性激素能促进人和动物生殖器官的发育

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【题目】核酸是生物大分子,包括 DNARNA两类。下列关于核酸的叙述,错误的是

A.核酸由CHONP等化学元素组成B.DNARNA都能携带遗传信息

C.组成核酸的基本单位是脱氧核苷酸D.绝大多数生物的遗传物质是DNA

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【题目】物质进出细胞的方式有多种。下列关于物质进出细胞方式的叙述,正确的是

A.生物大分子通过主动运输进出细胞B.植物细胞吸收K一定不需要消耗能量

C.小分子物质都通过自由扩散进出细胞D.细胞吸收离子种类与膜上蛋白质种类有关

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科目:高中生物 来源: 题型:

【题目】回答以下有关实验的问题。

Ⅰ.根据“观察DNARNA在细胞中分布”的实验回答下列问题:

1)水解时加入8%盐酸的目的是:盐酸能_______________,加速染色体进入细胞,同时使___________分离,有利于DNA与染色剂结合。

2)在鉴定蛋白质、糖类的实验所使用的试剂中,与吡罗红甲基绿染色剂用法相似的是__________

3)实验材料也可用紫色洋葱鳞片叶的表皮细胞来做,但要选择紫色洋葱鳞片叶的___(填“外”或“内”)表皮细胞,原因是__________

Ⅱ.现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和淀粉酶溶液各一瓶,可用双缩脲试剂、斐林试剂和淀粉溶液将他们鉴别出来。(注:淀粉酶是蛋白质,可将淀粉分解成麦芽糖)。

4)用一种试剂将上述四种溶液区分为2组,这种试剂是__________,其中发生显色反应的一组是_______溶液,不发生显色反应的是_________溶液。

5)用________________试剂区分不发生显色反应的一组溶液。

6)区分发生显色反应一组溶液的方法及鉴定结果是:显色组的两种溶液各取少许,置于不同的试管中,分别滴加5_____________溶液,充分振摇,静置半小时。向静置后的反应液中加入斐林试剂,出现砖红色沉淀的即为________________溶液。

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【题目】脂质体是以磷脂等物质制备的膜泡状结构。将磷脂、胆固醇或其他脂质的乙醚溶液加入到DNA溶液中,经特殊处理而得到带DNA的脂质体小泡,其可被受体细胞内吞而实现基因转移。下列叙述错误的是(

A.脂质体介导基因转移的原理是膜的流动性,可适用于多种动物受体细胞

B.动物细胞膜具有特异性糖蛋白,对导入的脂质体小泡会产生免疫反应

C.在包裹有正常基因的脂质体表面插入单克隆抗体可用于体内基因靶向治疗

D.若以植物细胞作为受体细胞,转移前对植物细胞去壁可提高转移效率

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