Question

基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。运用基因重组进行基因敲除是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如图所示。

请回答下列问题：

（1）在把与靶基因序列同源的目的基因导入受体细胞前，应选择一个合适的载体与之结合，形成的DNA分子称为________，在这个过程中所需的工具酶有________和________。

（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则选择的受体细胞应该是________。

（3）上述途径获得的动物，其后代是否都含目的基因。为什么？________。

（4）以质粒为载体，用同一种限制性内切酶切割质粒和目的基因，在切割后的载体与目的基因连接时，连接方式有________种。

（5）上述过程实现的重组类似于减数分裂中________时期的________现象。

Answer 1

答案：
解析：

答案：（1）重组DNA分子　限制性内切酶　DNA连接酶 　　（2）受精卵 　　（3）否，在形成生殖细胞时等位基因会发生分离 　　（4）3 　　（5）四分体　交叉互换 　　解析：（1）基因工程中常用的工具酶为限制性内切酶和DNA连接酶，目的基因与载体结合后形成重组DNA分子。 　　（2）由于动物体细胞的全能性较低，应用受精卵作为受体细胞。 　　（3）由于在受精卵中只存在一个目的基因，在形成配子的过程中等位基因分离，一半配子中不含目的基因。 　　（4）由于经切割后的目的基因和载体具有相同的黏性末端，在DNA连接酶的作用下载体和载体、目的基因和目的基因、载体和目的基因都有可能连接。 　　（5）由图中可知应为个别基因的替换，类似于减数第一次分裂前期的交叉互换现象。