Question

【题目】“且就洞庭赊月色，将船买酒白云边”。李白留下的这一脍炙人口的千古绝句经常在中央电视台播出。我市松滋特产、湖北名酒、誉满全国的“白云边酒”是以水、高粱、小麦为原料，通过固态发酵而成。大家公认的环境中存在的独特微生物是酿制其独特品质的关键因素之一。为了提取环境中的独特菌种，某高中学校生物研究性学习小组以优质的高粱和小麦为原料，制作培养基，搜集、分离空气中的微生物。请回答下列问题:

（1）该培养基在接种微生物前，必须先进行___________________灭菌。

（2）将上述培养基暴露在空气中培养一段时间后，取10g该培养基用无菌水制成100mL样品溶液。再将样品溶液稀释104倍后，各取样品溶液0. 1mL，在5个培养基平板上接种。培养一段时间后，平板上长出的微生物菌落数分别为13， 156， 462， 178和191。该过程采取的接种方法是____________。每克培养基样品中的微生物数量是__________________个。

（3）与用血细胞计数板记数相比，该计数方法测得的微生物数目要低。其原因是_______。

（4）酉良酒的主要微生物将葡萄糖分解为酒精的酶存在于___________ 。其生产酒的总反应式可表示为__________________________。

（5）为了研究发酵罐中酿酒微生物的生长情况，常要取样统计分析，并测定pH。若某同学未将取样的样品贴上标签，那么，确定取样样品顺序的主要依据是_______________。

Answer 1

【答案】高压蒸汽 稀释涂布平板法 1.75×108 死亡的微生物不能形成菌落 两个或多个菌体连在一起时形成一个菌落 细胞质基质 C6H12O62C2H5OH + 2CO2 + 少量能量 发酵液的pH

【解析】

1、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。

2、①酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌，因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。

②CO2可使澄清石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。

③橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色。

（1）该培养基是以优质高粱、上等小麦为原料制作的，高粱和小麦等原料中各种成分含量未知，属于天然培养基，培养基在接种微生物前，必须先进行灭菌，对培养基一般使用高压蒸汽灭菌。

（2）用于计数细菌菌落数的常用方法是稀释涂布平板法，统计的菌落数应介于30～300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数。每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目，所以每克该土壤样品中的菌落数为（156+178+191）÷3÷（10÷100）×105=1.75×108。

（3）由于死菌不能形成菌落以及两个或多个菌体未分离形成一个菌落时，往往统计的是一个菌落，所以用此计数方法测得的细菌数较少。

（4）酵母菌是真菌生物，无氧呼吸产生酒精的过程在细胞质基质中。故将葡萄糖分解为酒精的酶存在于细胞质基质中。其无氧呼吸生产酒精的总反应式可表示为C6H12O62C2H5OH + 2CO2 + 少量能量。
（5）某同学未将取样的样品贴上标签，那么，确定取样样品顺序的主要依据是发酵液的pH。