请回答PCR方面的有关问题: (1)引物是扩增过程中必须加入的物质.从化学本质上说.引物是一小段 . (2)引物是子链合成延伸的基础.如下图. 从理论上推测.第四轮循环产物中两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段所占DNA总数的比例为 . (3)设计引物是PCR技术关键步骤之一.某同学设计的一组引物不合理.请说明理由 . (4)在DNA聚合酶的作用下.两条子链的� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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（6分）请回答PCR方面的有关问题：

(1)引物是扩增过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段_______________。

(2)引物是子链合成延伸的基础，如下图。

从理论上推测。第四轮循环产物中两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段所占DNA总数的比例为。

(3)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物(只标注了部分碱基序列)不合理(如下图)，请说明理由。

（4）在DNA聚合酶的作用下，两条子链的延伸方向都是。

（5）假如引物都用³H标记，从理论上计算，所得DNA分子中含有³H标记的占。

（6）与体内DNA复制相比，PCR反应体系除引物外，还需加入哪种特别的物质？。

【答案】

（6分）(1)DNA或RNA （2）50%

(3)引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效

（4）从子链的5′端向3′端延伸（5）100％（6）Taq 酶

【解析】基因扩增中引物通常是一小段DNA或RNA片段，第二轮中含引物II（或考题中的引物A）比例为3/4，第三轮中占7/8，即所有DNA片段中，只有一个片段不含引物II，故推测在第四轮中，含引物II（或引物A）的比例为15/16。与两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段所占DNA总数的比例为50%，由于题图中的引物A和引物B均不在该片段的端点，因此第一轮循环后，得到的两DNA片段中两条脱氧核苷酸链都不等长，通过自行绘图可推知，第二轮中亦不会出现等长的引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

1、引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

2、引物扩增跨度：以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

3、引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

4、避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

5、引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

6、引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。

PCR技术扩增DNA需加入特定的Taq酶。复制过程子链的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸

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（6分）请回答PCR方面的有关问题：
(1)引物是扩增过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段_______________。
(2)引物是子链合成延伸的基础，如下图。

从理论上推测。第四轮循环产物中两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段所占DNA总数的比例为        。
(3)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物(只标注了部分碱基序列)不合理(如下图)，请说明理由                                。

（4）在DNA聚合酶的作用下，两条子链的延伸方向都是                        。
（5）假如引物都用³H标记，从理论上计算，所得DNA分子中含有³H标记的占         。
（6）与体内DNA复制相比，PCR反应体系除引物外，还需加入哪种特别的物质？       。

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科目：高中生物 来源：2011-2012学年四川省成都市第20中高二上学期半期考试生物（理）试卷 题型：综合题

海南某红树林是湿地自然保护区，它由滩涂、红树林、围基鱼塘等部分组成。某中学兴趣小组对红树林开展了为期一年的生态系统调研活动，请回答调研中的有关问题。

（1）对滩涂沙土中小动物丰富度的调查，应采取的取样方法是                 ；红树林群落中的物种在垂直方向上具有明显的分层现象，这种分层现象的生物学意义是                         。
（2）兴趣小组成员根据调查到的生物类群绘制出碳循环图解（如图1），从生态系统的组成成分上看，C代表     ，写出图中的食物链                               。同学们观察到黑脸琵鹭处在图中的最高营养级，则黑脸琵鹭增重0．1kg，至少需要生产者     kg。
（3）图1中能构成群落的是             ，图2中的乙相当于图1中的      。
（4）因环境污染造成D中出现大部分白化苗，对F、B数量的影响是             。
（5）若图1示一农业生态系统，某校生物研究性学习小组对其进行考察发现：秸秆都是当作燃料，粪便、废水均作为直接施入农田，由此造成能源和物质资源的浪费，引起环境污染，容易引起病虫害传播，农业成本高等不良后果。针对这一现象，该小组向有关部门建议，利用秸秆生产“再生纤维共混膜”作为地膜作用，可在一定程度上解决出现的问题。此膜可在自然条件下由图1的      （填字母）产生的          _______________催化分解为无机物供植物生长再利用。