Question

【题目】酸雨主要是大气中所含的S02造成的。研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，进行了相关实验。回答下列问题：

（1）采集菌种：在某热电厂烟囱周围区域采集土样，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要____________。将采集的土样进行稀释处理后，接种到培养基上进行培养。

（2）分离目的菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中，边搅拌边持续通入S02，驯化几分钟后接种到固体培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通S02的时间，与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的目的菌具有较强的____________的能力。

（3）活菌计数:为获得大量目的菌用于生产，在培养过程中需连续取样进行计数。____________法常用来统计样品中的活菌数目。通常情况下，用此方法得到的活菌数目往往比实际数目____________（填“高”或“低”），是因为________________________。

（4）检测目的菌对抗生素的敏感性:取该单菌落适当稀释后的液体2滴，接种于固体培养基表面，并用___________使菌液均匀分布。在37℃培养箱中培养24小时后，将大小相同且分别含有不同抗生素的圆纸片均匀置于该平板的不同位置，再培养一段时间，结果如下图所示（圆纸片周围的白色区域表示没有菌落分布），据此实验结果推测，五种抗生素中对该菌抑制作用最强的是_____________________。

（5）菌种保存:采用平板划线法分离纯化得到了脱硫细菌，可以采用____________的方法，对菌种长期保存。

Answer 1

【答案】灭菌利用SO2和耐酸稀释涂布平板低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落涂布器青霉素甘油管藏

【解析】

由题文描述可知：该题综合考查学生对微生物的实验室培养、微生物的分离与计数等相关知识的识记和理解能力。

(1)为了避免杂菌污染，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要灭菌。

(2) 分离目的菌的过程中，随着实验重复次数的增加，逐步延长通S02的时间和逐步降低培养基的pH，由此推知：最终分离得到的目的菌具有较强的利用SO2和耐酸能力。

(3) 在微生物的纯化培养过程中，稀释涂布平板法常用来统计样品中的活菌数目。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以通常情况下，用稀释涂布平板法得到的活菌数目往往比实际数目偏低。

(4) 运用稀释涂布平板法接种微生物时，所用的工具是涂布器。圆纸片周围出现的透明圈（白色区域）处没有菌落分布，是由于相应的抗生素将目的菌杀死所致，所以透明圈越大，说明相应的抗生素对该菌抑制作用越强，据此分析图示可知：五种抗生素中对该菌抑制作用最强的是青霉素。

(5) 对菌种长期保存，可采用甘油管藏的方法。