Question

【题目】[生物一选修1:生物技术实践]

长期使用除草剂会污染环境，研究发现一除草剂（有机物）能被土壤中某细菌（M）降解。下图为分离能降解该除草剂的M菌种的过程。请回答下列相关问题：

（1）在液体培养基的基础上制备固体培养基时常用的凝固剂是_______________。

（2）土壤有“微生物的天然培养基”之称。为了获取能降解该除草剂的M菌种，选择的土壤样品应来自

__________。图中①过程所用的培养基中需要加入____________________作为唯一碳源。进行选择培养的目的是____________________。

（3）图中②过程划线所用的工具为__________，该工具在使用前后都要进行__________灭菌。

（4）若要检测土样中的细菌含量，应采用__________法进行接种。先将1mL土壤溶液稀释100倍，然后随机选取4个经灭菌处理的平板，其中3个平板上分别涂布0.1mL稀释液，1个平板未涂布稀释液，适当培养后，4个平板上的菌落数分别为39、38、37和0，则可计算得出每升土壤溶液中的活菌数为__________个。

Answer 1

【答案】 琼脂 该除草剂严重污染的土壤 该除草剂 增加目的菌的浓度 接种环 灼烧 稀释涂布平板 3.8×107

【解析】本题考查微生物接种与选择培养、微生物计数等知识，要求考生掌握无菌技术，掌握微生物接种、培养基制备等方法，能利用选择培养基进行微生物选择培养和计数，此题难度不大。

（1）在液态培养基的基础上制备固体培养基时常用的凝固剂是琼脂。

（2）土壤有“微生物的天然培养基”之称，根据题意，为了获取能降解该除草剂的M菌种，选择的土壤样品应来自被该除草剂严重污染的土壤。图中①过程是选择培养，目的是增加目的菌（即能降解该除草剂的M菌种）的浓度，故所用的选择培养基中需要加入该除草剂作为唯一碳源，以促进目的菌种的生长繁殖，抑制其它微生物生长繁殖。

（3）图中②过程所用的方法是平板划线法，划线所用的工具为接种环，接种环在使用前后都要进行灼烧灭菌，以避免杂菌污染。

（4）若要检测土样中的细菌含量，应采用稀释涂布平板法进行接种；即先将1mL土壤溶液稀释100倍，然后随机选取4个经灭菌处理的平板，其中3个平板上分别涂布0.1mL稀释液，1个平板未涂布稀释液，适当培养后，4个平板上的菌落数分别为39、38、37和0，即对照组的菌落数为0，说明平板灭菌彻底，则根据三个实验组的数据可计算得出每升土壤溶液中的活菌数为（39+38+37）3x1000x100= 3.8×107个。