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    如图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料．图中质粒表示基因工程中经常选用的载体--pBR322质粒，Amp表示青霉素抗性基因，Tet表示四环素抗性基因．根据如图回答下列问题（限制酶Pst，1、EcoR1和HindⅢ切割形成的末端均不相同）；

    （1）过程②需要
     
    酶，得到的cDNA一般比从基因组文库中获得的目的基因要小的多，原因是
     
    ．过程④需要
     
    酶，过程⑤中要提高成功率，常用
     
    处理大肠杆菌．
    （2）如果用限制酶Pst、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒-pBR322进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时，则形成的DNA片段共
     
    种．
    （3）基因表达载体除了目的基因和抗性基因外，至少还有
     
    等（至少答两个）．
    （4）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程④⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌（不含Amp′、Tet′抗性质粒）先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示．接种到甲培养基上的目的是筛选
     
    的大肠杆菌，含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态是
     
    、
     
    ，也可以用
     
    方法进行检测．
    （5）酵母菌细胞也常常作为基因工程的受体细胞，与大肠杆菌等细胞相比，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行
     
    并分泌到细胞外，便于提取．
    考点：基因工程的原理及技术
    专题：
    分析：根据图示可知，含有重组质粒的大肠杆菌能在四环素培养基中生存，但不能在青霉素培养基中生存，可知切割质粒时应选用的酶是限制酶PstI，破坏了青霉素抗性基因．甲、丙培养基中含有四环素，因此能在甲和丙中生长的大肠杆菌含有四环素抗性基因，包括导入普通质粒和重组质粒的大肠杆菌；乙培养基中含有四环素和青霉素，因此能在乙中生长的是导入普通质粒的大肠杆菌．与丙相比，乙培养基中少了两个菌落，说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌成功导入了重组质粒．
    解答： 解：（1）过程②是mRNa合成DNA过程，为逆转录过程，需要逆转录酶．逆转录获得的cDNA 中没有内含子，将目的基因与运载体连接需要DNA连接酶．将目的基因导入微生物细胞，常用CaCl2 处理，使之成为感受态细胞．
    （2）PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ分3种酶分别用1，2，3表示，一种酶酶切时，一共可以得到3种不同长片段；两种酶酶切时，可得到1-2，2-1，2-3，3-2，1-3，3-1六种片段；三种酶酶切，可得到1-2，2-3，3-1三种片段，与前面重复，因此一种可形成9种片段．
    （3）基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点．
    （4）在甲中能生长的是具有四环素抗性的细菌，含有四环素抗性基因；与丙相比，乙培养基中少了两个菌落，说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌成功导入了重组质粒，而且目的基因插入质粒后，破坏了青霉素抗性基因，使含有目的基因的大肠杆菌不能在含有青霉素的乙培养基上生长，但四环素基因是完好的，则含有目的基因的大肠杆菌能在含有四环素的丙培养基上生长．目的基因的检测也可用DNA分子杂交法．
    （5）酵母菌为真核生物，细胞内具有对分泌蛋白加工的内质网和高尔基体等细胞器，细菌等原核生物，不具有内质网和高尔基体等细胞器．
    故答案为：
    （1）（逆）反转录    不含内含子    DNA连接   Ca2+（或CaCl2溶液）
    （2）9
    （3）启动子、复制原点、终止子等
    （4）含四环素抗性基因   在乙中不能存活   在丙中存活   DNA分子杂交
    （5）加工（或修饰 ）
    点评：本题考查了基因工程应用的关知识，考查了学生对相关知识的理解和掌握情况，对图的分析判断能力．
    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列关于用高倍镜观察人的口腔上皮细胞线粒体实验的说法，不正确的是（　　）
    A、牙签消毒，实验前漱口都是为了保证该实验的准确性
    B、制装片时在载玻片上滴一滴0.9%的NaCl溶液，目的是维持口腔上皮细胞的正常形态
    C、在高倍镜下观察，可以看到被杀死细胞的线粒体呈蓝绿色，而细胞质接近无色
    D、在高倍镜下观察，可以看到线粒体呈短棒状，圆球状，线形等

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    回答下列生物有机物的相关问题
    （1）动植物细胞共有的糖有
     
    ，
     
    是动物细胞中的多糖．
    （2）属于固醇类物质的有
     

    （3）氨基酸脱水缩和过程中，脱去的水分子数=肽键数=
     
    ，环肽脱去的水分子数=
     
    ．
    （4）构成核酸的基本结构单位是
     
    ，共有
     
    种，含氮碱基共有
     
    种，DNA特有的是
     
    ，RNA特有的是
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达．但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选．已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-，据图回答：

    （1）图1过程①所需要的酶是
     
    ．
    （2）在构建基因表达载体过程中，应用限制性核酸内切酶
     
    切割目的基因，用限制性核酸内切酶
     
    切割质粒．用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过
     
    原则进行连接．人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是
     
    ．
    （3）在过程③一般将受体大肠杆菌用
     
    处理，以增大
     
    的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞．
    （4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如图2中a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了
     
    ，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图2中b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）．与图2中b空圈相对应的图2的a中的菌落表现型是
     
    ，这些细菌中导入了
     
    ．
    （5）人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    某化合物所含的元素有C、H、O、N、S，该化合物不可能具有的一项功能是（　　）
    A、携带氨基酸进入核糖体
    B、识别突触小泡释放的递质
    C、用于基因工程获得黏性末端
    D、催化葡萄糖在细胞内氧化分解

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列有关微生物培养的说法，正确的是（　　）
    A、制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板
    B、分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源
    C、配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性
    D、在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图表示动物、植物细胞二合一亚显微结构模式图．根据图回答（括号内填数字，横线上填汉字）：

    （1）若某细胞同时含有A、B两图中各种细胞结构，则为
     
    细胞．
    （2）图中不含磷脂的细胞器有
     
    ．
    （3）结构5为
     
    ，在植物细胞有丝分裂时，与细胞壁的形成有关．
    （4）细胞内有双层膜结构但又不属于细胞器的是
     
    ．
    （5）如果B图为大蒜根成熟区细胞，则应该没有[
     
    ]
     
    ．
    （6）若该细胞是西瓜果肉细胞，糖类主要存在于[
     
    ]
     
    中．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    铁皮石斛生长于阴湿环境，为研究强光对其光 合作用的影响，分别用强度为500、2000?mol?m-2?s-1的强光预处理20min，随后将其置于弱光下 测定光合速率，结果如图所示．以下分析正确的是 （净光合速率为零时的光强度值称为光补偿点）（　　）
    A、铁皮石斛最适光照强度为100μmol?m-2?s-1
    B、强光预处理后，叶片固定光能的效率提高
    C、预处理光照强度越大，随后的呼吸强度越小
    D、预处理光照强度越大，随后的光补偿点越大

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    如图所示叶面积指数与光合作用和呼吸作用的关系（叶面积指数是指单位土地面积上植物叶面积的数量．此值越大，表示植物叶片交错程度越大）．图中阴影部分表示的生理过程和森林合理开采的叶面积指数分别为（　　）
    A、蒸腾作用失水量；6
    B、光合作用积累有机物量；8
    C、矿质元素的含量；8
    D、呼吸作用消耗有机物量；6

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