Question

某同学想研究氨基酸的分离和鉴定的方法。已知实验室中有0．5%的赖氨酸,脯氨酸,缬氨酸,苯丙氨酸,亮氨酸溶液以及它们的混合液(各组份浓度均为0．5%)。

现提供如下器材和试剂：

A．器材

 1．层析缸 2．毛细管 3．喷雾器 4．层析滤纸 5．其他相关器材(如剪刀,铅笔,U形扣等)

B．试剂

1．扩展剂:4份水饱和的正丁醇和1份醋酸的混合物

2．显色剂:0．1%水和茚三酮溶液

若该同学想证明混合液确实含有上述5种氨基酸，请利用题给条件设计试验：

1)实验原理：

A．除脯氨酸,羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外,所用a－氨基酸和一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。

B．在一定条件下,                                                             

                                                                。

2)实验步骤：

①取层析滤纸一张,剪成20厘米长,14厘米宽的滤纸条,在纸的一端距边缘2-3厘米处用铅笔画一条直线,再此直线上每间隔2厘米作一记号,共需作       处记号．

②                                                                          

                                                    。

③将处理好的滤纸条卷成筒状用U形扣固定,放入加好了扩展剂的层析缸中，待扩展剂上升到一定阶段时取出滤纸,自然风干。本步骤的注意事项是:                      

                                                      。

④                                                                           

                                                              ．

3)请在下图中绘出滤纸条上的预期结果：(已知扩散速度为赖氨酸<脯氨酸<缬氨酸<苯丙氨酸<亮氨酸)

Answer 1

         1) 实验原理：不同氨基酸在扩展剂的溶解度不同,所以在滤纸上的扩散速度不同,从而出现在滤纸的不同位置上。

2)实验步骤：

①  6 

② 用毛细管吸取氨基酸样品点在标记上 ,干燥后重复2-3次 。

③ 点样的一端在下,扩展剂的液面要低于点样线

④用喷雾器向滤纸上均匀喷上0.1%的茚三酮溶液,待干燥后,观察并记录层析斑点的位置.

3)略