Question

某同学想研究氨基酸的分离和鉴定的方法。已知实验室中有0.5%的赖氨酸,脯氨酸,缬氨酸,苯丙氨酸,亮氨酸溶液以及它们的混合液(各组份浓度均为0.5%)。现提供如下器材和试剂：

A.器材

1.层析缸 2.毛细管 3.喷雾器 4.层析滤纸 5.其他相关器材(剪刀,铅笔,透明胶带等)

B.试剂

1.扩展剂:4份水饱和的正丁醇和1份醋酸的混合物（作为层析液使用）2.显色剂:0.1%茚三酮溶液

一)若该同学想证明混合液确实含有上述5种氨基酸，请利用题给条件设计试验：

1)实验原理：

A.所有氨基酸和一切蛋白质都能和茚三酮发生颜色反应。

B.在一定条件下, 不同氨基酸在扩展剂的溶解度不同,所以在滤纸上的扩散速度不同,从而出现在滤纸的不同位置上。

2)实验步骤：

①取层析滤纸一张,剪成20厘米长,14厘米宽的滤纸条,在纸的一端距边缘2-3厘米处用铅笔画一条直线,在此直线上每间隔2厘米作一记号,共需作　　　 处记号.

②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

③将处理好的滤纸条卷成筒状用透明胶带固定,放入加好了扩展剂的层析缸中，待扩展剂上升到一定阶段时取出滤纸,自然风干。本步骤的注意事项是:　　　　　　　　　　　

④　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

3)请在下图中绘出滤纸条上的预期结果：(已知扩散速度为赖氨酸<脯氨酸<缬氨酸<苯丙氨酸<亮氨酸)

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　

用“＋”表示起点位置；用“○”表示氨基酸扩散的相对位置。铅笔细线（示起始位置）

4)若用上述5种氨基酸合成5肽,在不考虑氨基酸种类重复情况下,形成的5肽最多有　 种。

 

Answer 1

2)实验步骤：

① 6 ②毛细管吸取氨基酸样品点在标记上,干燥后重复2-3次。③ 点样的一端在下,扩展剂的液面要低于点样线。④用喷雾器向滤纸上均匀喷上0.1%的茚三酮溶液,待干燥后,观察并记录层析斑点的位置.

3)（说明：其它合理的图也给分）

4) 120种