Question

【题目】梨树胶孢炭疽病是严重危害梨树的一种真菌病害。目前生产上常用应对炭疽病的防治策略主要侧重于化学药剂防治，该方法极大地危害人类健康，破坏生态环境。为了改善这种状况，科研工作者对梨树胶孢炭疽病生物防治菌(以下简称为“生防菌”)进行分离纯化，具体流程如下图：

据图回答下列问题：

(1)分离和筛选菌株的培养基为___________。其原理是______________________。

(2)分离和筛选出来的菌株，要进行纯化处理，纯化处理的常用方法有___________和___________以获得单菌落。

(3)纯化得到菌株经培养会表现出稳定的菌落特征，菌落特征包括菌落的___________。

(4)最后确定生防菌为RT-30菌株的理由_________________________________。

(5)研究未知的微生物时，一定注意进行规范的无菌操作，以防研究者___________。使用后的培养基在丢弃前需进行______________________。

Answer 1

【答案】选择培养基 提供有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物生长 平板划线法 稀释涂布平板法 大小、形态、隆起程度和颜色 能够抑制炭疽病菌的生长繁殖，而且通过对病原菌抑菌活性的测定为最大抑菌活性的菌株为RT-30 被致病微生物感染 灭菌处理(以免污染环境)

【解析】

培养基是为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质，营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和；培养基根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等，根据用途分选择培养基、鉴别培养基，根据性质分为液体、半固体和固体培养基。筛选目的微生物需要使用选择培养基；微生物的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数。

（1）微生物的培养基根据用途分选择培养基、鉴别培养基，如分离和筛选菌株应该使用选择培养基，该培养基可以提供有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物生长。

（2）纯化菌株常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（3）菌落的特征包括菌落的大小、形态、隆起程度、颜色等。

（4）图示流程的最后一步确定的生防菌为RT-30菌株，因为其能够抑制炭疽病菌的生长繁殖，而且通过对病原菌抑菌活性的测定为最大抑菌活性的菌株为RT-30。

（5）根据题意分析，若研究的未知微生物，则需要注意规范的无菌操作，以防止感染研究者；同时使用后的培养基应该进行灭菌处理后才能丢弃，以免污染环境。