现有甲.乙两种可能有一定致畸.致癌作用的化学物质.利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性.并比较二者毒性的强弱.请完成下列实验报告:Ⅰ.实验材料:小白鼠胚胎.Ⅱ.药品用具:胰蛋白酶液.动物细胞培养液.动物细胞固定液.适宜浓度的龙胆紫溶液.滴管.培养皿.剪刀.锥形瓶.细胞培养箱.载玻片.盖玻片.光学显微镜.小白鼠正常体细胞有丝分裂高� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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(7分)现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请完成下列实验报告：
Ⅰ.实验材料：小白鼠胚胎。
Ⅱ.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。
Ⅲ.实验原理：　                                            。
根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。
Ⅳ.实验步骤：
(1)制备细胞悬浮液：
把小白鼠胚胎进行处理离散成单个细胞后，加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
（2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，分别加入等量的细胞悬浮液。
② 　                                                   。
③C瓶不作处理，作为对照。
把三个培养瓶放在37℃(或适宜温度)的细胞培养箱中培养
（3）制作临时装片：
①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使细胞从瓶壁上脱落，加入动物细胞固定液杀死细胞并固定其分裂相。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的悬浮液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，加1～2滴适宜浓度的　    染色，3～5min后，盖上盖玻片，制成临时装片。
（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，按照　    的顺序观察，寻找处于有丝分裂　    期的细胞，观察其染色体，并与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该细胞总数的百分数(Q值)。
V.实验结果：

培养瓶	A	B	C
Q值	1.3％	12.5％	0.1％

VI.实验结论：　（2分）。

有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体结构和数量变异（答出有毒物质使细胞发生变异就可以给分） Ⅳ.（2）向A、B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀（3）②龙胆紫溶液（4）先用低倍镜后用高倍镜中 VI.甲乙两种化学物质具有毒性，且乙的毒性比甲的毒性大

解析试题分析：有毒物质使细胞发生变异，根据实验材料中的龙胆紫（碱性染料，可以将染色体染成深色）可知，将有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体数量和结构变异。实验设计时要遵循对照原则和单一变量原则，所以本实验要设计三组实验，单一变量是有毒物质的有无和有毒物质的种类。实验步骤为：（1）制备细胞悬液；（2）进行细胞培养：取A、B、C三个洁净的培养瓶，分别加入等量的细胞悬液；向A、B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀；C瓶不作处理，作为对照；把3个培养瓶放在37℃（或适宜温度）的细胞培养箱中培养。（3）制作临时装片，该过程中要用龙胆紫对染色体进行染色便于观察。（4）镜检和统计（先用低倍镜后用高倍镜）：把临时装片放在显微镜下，寻找处于有丝分裂中期（该时期细胞中染色体形态稳定，数目清晰，是观察染色体形态和数目的最佳时期）的细胞，并与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数（Q值）。根据表中结果可知，甲、乙两种化学物质均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大。
考点：本题考查探究实验，意在考查考生具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。

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