Question

【题目】表格是筛选异养型细菌的培养基配方；图是采用纯化微生物培养的一种接种方法接种后培养的效果图。

KH2PO4	1．4g
Na2HPO4	2．1g
MgSO4·7H2O	0．2g
FeCl3	0．1g
X	1g
维生素	微量
琼脂	15g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL

（1）若用该培养基分离土壤中有分解苯胺能力的异养型细菌，此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_______，该培养基从物理性质看属于_______培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是_______。

（2）如上图是采用纯化微生物培养的一种接种方法接种后培养的效果图，该接种方法是__________，出现上图结果可能的操作失误是____________________。若该小组采取正确的操作方法，过程和结果为：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为_______个。

（3）若用该培养基筛选分解纤维素的微生物，常用到刚果红染色法，刚果红染色法的原理是：________________________________________________________。

Answer 1

【答案】碳源和氮源 固体 高压蒸汽灭菌法 稀释涂布平板法 涂布不均匀 5.7×107个/L 刚果红能和纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌

【解析】

据图表分析：1、图中的接种方法是稀释涂布平板法；

2、表中所给的培养基配方是细菌的固体培养基配方，表中已知成分中缺少碳源和氮源，必须有X物质提供．

3、微生物培养基制作完成后，应该先调整pH，再灭菌，对培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌法．常用的在固体培养基上的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法，尿素分解菌可以用酚红指示剂检测，纤维素分解菌可以用刚果红染色法鉴定。

（1）根据培养基的配方可以看出，所给的物质中不能为微生物提供碳源和氮源，因此微生物生长所需要的碳源和氮源，可以由X提供；

该培养基中加入了琼脂作为凝固剂，因此从物理性质看属于固体培养基，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。

（2）图中看出在培养皿上形成了单个菌落，所以采用的方法是稀释涂布平板法，图中的操作错误是涂布不均匀。根据细菌数目的计算公式：，3个平板上的菌落数分别为56、58和57，所以平均值为57，每升菌液中细菌个数=个/L。

（3）纤维素分解酶的鉴定常用刚果红染色法，其原理是刚果红能和纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。