Question

6．在农业生产中为防治病虫害而大量使用农药，从而使农产品以及农业生态环境中农药残留严重超标、农产品市场竞争力严重下降．针对该现状，由南京农业大学的李顺鹏教授领导的团队经过多年研究，首创了农药残留微生物降解技术．通过筛选高效农药残留降解菌株，来清除土壤、水体、农产品中的有机污染物，解决了物理、化学处理修复难度大，成本高及二次污染的问题．其中有机磷降解菌降解甲基对硫磷（一种含氮有机农药）的效果达100%．目前使用该项技术生产的无公害大米经中国绿色食品测试中心检测，无农药残留，达到出口标准，获得绿色食品证书．
图是研究人员筛选有机磷降解菌的主要步骤，请分析回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以甲基对硫磷为唯一氮源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于选择培养基．
（2）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染，接种前通常应将培养皿放在干热灭菌箱内灭菌，培养基放在高压蒸汽灭菌锅内灭菌．
（3）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法接种时应对接种针采用灼烧灭菌，且整个操作过程都应在酒精灯火焰附近进行．接种完成后应将培养皿倒置（填“正放”或“倒置”）
（4）培养过程中需振荡培养，由此推测该“目的菌”的细胞呼吸类型为有氧呼吸．培养若干天后，应选择最少的培养液中的菌种接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量增加．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示筛选有机磷降解菌的主要步骤，需要用以甲基对硫磷为唯一氮源的培养基，选出能降解甲基对硫磷的菌株；培养若干天后，选择甲基对硫磷含量较少的培养液中的菌种接种到新的培养液中连续培养；重复多次直至获得目的菌．

解答 解：（1）欲筛选出能降解甲基对硫磷的菌株，培养基中应只含有甲基对硫磷而无其它氮源，这样不能降解甲基对硫磷的细菌在此培养基上不能生存；从功能上说，这类培养基属于选择培养基．
（2）玻璃器皿（如培养皿）可以采用干热灭菌法；培养基适宜放在高压蒸汽灭菌锅内灭菌．
（3）分离纯化菌种时，采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的 分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种．微生物的接种工具（如接种针、接种环等）应采用灼烧灭菌法；接种的整个过程都应该在酒精灯火焰附近进行，防止空气中的杂菌污染．接种完成后应将培养皿倒置．
（4）振荡培养的目的是提供氧气，说明该“目的菌”的细胞呼吸类型为有氧呼吸．培养若干天后，含有降解甲基对硫磷菌种的数目越多的培养基中硫磷含量越少，所以能应选择甲基对硫磷含量最少的培养液中的菌种接种到新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量增加．
故答案为：
（1）甲基对硫磷     选择
（2）干热灭菌箱    高压蒸汽灭菌锅
（3）平板划线法    稀释涂布平板法     灼烧     酒精灯火焰
（4）有氧呼吸    最少

点评 本题以甲基对硫磷为素材，结合筛选有机磷降解菌的主要步骤，考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的相关知识，重点要求考生识记无菌技术中的灭菌方法，能采用适宜的方法对不同的物体进行灭菌，属于考纲识记和理解层次的考查．