Question

1．桶装纯净水是同学们日常饮水来源之一，纯净水真的“纯净”吗？某小组同学为此进行了相关实验．请回答下列各步骤的相关问题：
（1）制备培养基：培养基中加入的蛋白胨、淀粉可为细菌提供相同营养的是碳源．
（2）灭菌：对培养基进行灭菌，应该采用的方法是高压蒸汽灭菌．
（3）接种及培养：为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了“纯净水”样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验．
（4）菌落观察与计数：培养24小时后，某一个平板经培养后的菌落分布如图所示，推测接种时可能的操作失误是涂布不均匀．

Answer 1

分析 统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数．

解答 解：（1）培养基的成分主要包括碳源、氮源、水、无机盐等，培养基中加入的蛋白胨、淀粉均可为细菌提供碳源．
（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是高压蒸汽灭菌．
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了“纯净水”样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验．
（4）由图可知，该同学的接种方法是稀释涂布平板法；图中菌落分布不均匀，由此推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀．
故答案为：
（1）碳源    
（2）高压蒸汽灭菌　 
（3）恒温培养箱　  无菌水  
（4）涂布不均匀

点评 本图结合图解，考查微生物的分离和培养等知识，要求考生识记培养基的成分、实验室中常用的消毒和灭菌的方法；掌握接种微生物的方法，能根据图中信息准确答题．