Question

19．苹果醋具有营养丰富，增强机体免疫力，护肤养肝等多种功效，以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如图1，请分析回答：

（1）图1甲过程中使用的微生物的代谢类型是异养兼性厌氧型，适当控制发酵温度，经过10～12天后，要检测样液中是否产生酒精，可以用（酸性）重铬酸钾溶液来检验．
（2）利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是C₂H₅OH+O₂$\stackrel{酶}{→}$CH₃COOH+H₂O．
（3）图1乙过程中使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得，如图2操作是分离纯化过程中利用平板划线法进行接种，在操作过程中应注意的事项有下列哪几项abcd（填字母）．
a．每次划线前和结束时都需要灼烧接种环；
b．灼烧接种环后，待其冷却后再划线；
c．第二次及以后的划线，要从上一次划线的末端开始划线；
d．最后一次划线不能和首次划的线相连．
（4）为了保持菌种的纯净，对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法．
（5）选用图3的装置制作果酒时，为适当提高果酒的产生速率，充气口应先打开后关闭，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是防止空气中微生物的污染．

Answer 1

分析 1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
3、菌种保存

	临时保存法	甘油管藏法
适用对象	频繁使用的菌种	长期保存的菌种
培养及类型	固体斜面培养基	液体培养基
温度	4℃	-20℃
方法	菌落长成后于冰箱中保存，每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上	将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于冷冻箱内保存
缺点	菌种易被污染或产生变异	\\

4、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；酒精可以用酸性重铬酸钾溶液来检验，溶液的颜色由橙色变成灰绿色．
（2）利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是：C₂H₅OH+O₂$\stackrel{酶}{→}$CH₃COOH+H₂O．
（3）微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法．图2操作是分离纯化过程中利用平板划线法进行接种，在操作过程中应注意：a每次划线前和结束时都需要灼烧接种环；b灼烧接种环后，待其冷却后再划线；c第二次及以后的划线，要从上一次划线的末端划线；d最后一次划线不能和首次划的线相接触．
（4）为了保持菌种的纯净，对于长期需要保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法．
（5）利用酵母菌进行酒精发酵时，应该先通气（让酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖）后密封（让酵母菌进行无氧呼吸产生酒精）．因此，利用图2装置制果酒时，应先开机后关闭．排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，以防止空气中微生物的污染．
故答案为：
（1）异养兼性厌氧型       （酸性）重铬酸钾溶液
（2）C₂H₅OH+O₂$\stackrel{酶}{→}$CH₃COOH+H₂O  
（3）平板划线          abcd  
（4）甘油管藏
（5）先打开后关闭         防止空气中微生物的污染

点评 本题考查果酒和果醋的制作、微生物的分离和培养，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物的种类及其代谢类型，掌握果酒、果醋制作的原理；识记无菌技术，掌握接种微生物常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．