Question

【题目】回答与微生物实验室培养有关的问题：

（1）在制备固体培养基时需加入的凝固剂，常用的是___________。

（2）为防止外来杂菌入侵，对__________等可采用干热灭菌法进行灭菌。

（3）如图为平板划线法接种后的示意图。在划线接种的整个操作过程中，对接种环至少需进行________次灼烧灭菌。接种后盖上皿盖，将平板_____放入恒温箱中培养，这样放置的目的是______。

（4）为统计培养液中细菌的数目，稀释后滴于培养基表面，用涂布器涂匀，这种接种方法称为_____。用该方法统计样本菌落数时需要设计对照组，其目的是______________________。

（5）筛选能分解纤维素的细菌时，应在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入_____________。

Answer 1

【答案】】琼脂 玻璃器皿和金属用具 6 倒置 避免培养基被污染和防止培养基水分过快挥发 稀释涂布平板法 判断培养基是否被杂菌污染（或“培养基灭菌是否合格”） 刚果红

【解析】

1、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、实验室常用的灭菌方法

①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；

②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；

③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。

（1）制备固体培养基最常用的凝固剂是琼脂。

（2）为防止外来菌入侵，需要进行消毒灭菌，对耐高温的需要保持干燥的物品如玻璃器皿和金属用具等，可采用干热灭菌法进行灭菌。

（3）平板划线接种过程中需在接种前、每次划线后对接种环进行灼烧灭菌，图中共接种5个区域，故接种环至少需要进行6次灼烧灭菌处理。微生物培养过程中，易产生冷凝水，为防止水珠滴在培养基表面造成污染，培养时需将平板倒置。

（4）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。用该方法统计样本菌落数时需要设计对照组，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，其目的是检测培养基平板灭菌是否合格。

（5）刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。