Question

微生物的培养与鉴定．
Ⅰ．为了检测饮用水中是否会有某种细菌，配制如下培养基进行培养：
（1）表中培养基可培养的微生物同化作用类型是

 

．
（2）若将青霉素加入培养基中，则该培养基从功能上区分，应属于

 

培养基，可用于培养

 

等微生物．
（3）表中营养成分共有

 

类．
（4）不论何种培养基，在各种成分都熔化后灭菌前，要进行的是

 

．
（5）表中各成分质量确定的原则是

 

．
（6）若表中培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是

 

．
Ⅱ．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和

编号	成分	含量
①	粉状硫	10g
②	（NH4）2SO4	0.4g
③	K2HPO4	4.0g
④	MgSO4	9.25g
⑤	FeSO4	0.5g
⑥	CaCl2	0.5g
⑦	H2O	100ml

酵母菌混合在一起．请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：
（7）主要步骤：
①制备两种培养基：一种是

 

培养基，另一种

 

的培养基．分别分成两份，依次标上A，A′和B，B′，备用．
②分别向A、B培养基中接种

 

．
③接种后，放在恒温箱中培养3～4天．
④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培养基中．
⑤接种后，把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3～4天．
（8）回答问题：在步骤①②中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有

 

、

 

、

 

．第④⑤两个步骤的目的是

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,培养基对微生物的选择作用

专题：

分析：1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；
2、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；
3、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．
4、实验设计的原则有单一变量原则和对照原则．

解答： 解：Ⅰ、（1）分析表格可知，该培养基没有有机碳源和氮源，故说明培养的微生物能利用无机碳和氮源，说明此微生物同化作用类型是自养型微生物．
（2）若将青霉素加入培养基中，则该培养基从功能上区分，应属于选择培养基，可用于培养酵母菌（真菌、古细菌、具有抗青霉素基因的细菌），等微生物．
（3）表中营养成分共有3类，即水、无机盐、生长因子．
（4）不论何种培养基，在各种成分都熔化后灭菌前，要进行的是调整pH值．
（5）表中各成分质量确定的原则是依微生物的生长需要确定．
（6）若表中培养基用于菌种鉴定，该培养基应为固体培养基，故应该增加的成分是琼脂．
Ⅱ、（7）要分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌，要制备两种培养基：一种是无氮培养基，另一种加青霉素的培养基．分别分成两份，依次标上A，A′和B，B′，备用．分别向A、B培养基中接种混合菌．
（8）为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有培养基高压蒸气灭菌、接种环在酒精灯火焰上灭菌、接种过程在酒精灯火焰附近进行，第④⑤两个步骤的目的是获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌．
故答案为：
Ⅰ、（1）自养型微生物
（2）选择培养基    酵母菌（真菌、古细菌、具有抗青霉素基因的细菌）
（3）3
（4）调整pH值
（5）依微生物的生长需要确定
（6）琼脂（或凝固剂）
Ⅱ、（7）①无氮　　　加青霉素        ②混合菌
（8）培养基高压蒸气灭菌　　　　接种环在酒精灯火焰上灭菌   接种过程在酒精灯火焰附近进行　　　　获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌

点评：本题主要考查微生物实验室分离及相关应用，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间内在联系的能力．