Question

【题目】肌肉生长抑制素（MSTN）是肌细胞生长发育的负调控因子，MSTN基因突变能使肌肉量增加，从而提高瘦肉率。下图是制备MSTN基因敲除猪的流程图。

回答下列问题。

（1）体外培养胚胎干细胞时，应定期更换培养液，可防止________。

（2）用________处理2号猪能使其超数排卵。对卵母细胞去核常用________方法，去核的目的是_______。

（3）与体细胞相比，用胚胎细胞更容易获得基因敲除猪，原因是________。

（4）为获得较多MSTN基因敲除猪，在进行胚胎移植前可运用________技术。3号猪应满足的条件是________。

（5）若要检测MSTN基因敲除猪是否成功敲除MSTN基因，可采用________（答出1点即可）方法进行检测。

Answer 1

【答案】细胞代谢产物对细胞造成伤害 促性腺激素 显微操作去核法 保证重组胚胎核基因均来自于供体细胞 胚胎细胞分化程度低，全能性高 胚胎分割 有健康的体质和正常的繁殖能力，生理状态可以受孕 DNA分子杂交；抗原-抗体杂交

【解析】

动物细胞培养：在动物细胞的培养液中需加入有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸及血清（两盐、两素、两酸、一血清），以保证细胞的正常生命活动。

胚胎移植：一般将胚胎培养到桑葚胚或囊胚时期即可进行移植，在移植之前可以进行胚胎性别鉴定确定胚胎性别，也可以进行胚胎分割，增加胚胎数目，但是注意在分割时需要将胚胎的内细胞团均等分割，保证分割后胚胎发育正常。

（1）在培养动物细胞时，定期更换培养液是防止细胞代谢产物对细胞造成伤害，保证细胞的正常生命活动。

（2）供体超数排卵是由于促性腺激素作用的结果，对于动物细胞常用的去核方法是显微操作去核法，去除卵母细胞核的目的是保证重组胚胎核基因均来自于供体细胞。

（3）细胞全能性越高越容易发育成个体，胚胎细胞较体细胞分化程度低，全能性高，所以更容易发育成个体。

（4）为获得更多个体，可以在胚胎移植前进行胚胎分割，从而得到更多基因型相同个体。3号猪为胚胎移植受体母猪，起代孕作用，所以应有健康的体质和正常的繁殖能力，并且生理状态可以受孕。

（5）检测MSTN基因敲除猪是否成功即检测是否有MSTN基因或是否有相关表达产物，所以可以利用DNA分子杂交或抗原-抗体杂交技术检测基因敲除是否成功。