下列图1和图2分别表示固定化酶的反应柱示意图和凝胶色谱法分离蛋白质的示意图,二者具有一定的相似性,结合图示回答相关问题。
(1)图1中的固定化酶是 ,能将葡萄糖转化成果糖,固定该酶的方式为 (“包埋法”“化学结合法”或“物理吸附法”);而对于固定化酵母细胞多采用 法。
(2)图1中利用固定化酶与直接使用酶催化反应相比有哪些优点?
(3)图2中的凝胶颗粒实际上是一些微小的 ,图2中最先流出的是相对分子质量 (填“较大”或“较小”)的蛋白质,原因是
。
(4)图1中的反应柱和图2中的凝胶色谱柱均处于磷酸缓冲溶液中,缓冲溶液的作用是 。
答案:(1)葡萄糖异构酶 物理吸附法 包埋 (2)①固定化酶能与产物分离,提高产物的纯度;②固定化酶可以重复使用,提高酶的利用率。 (3)多孔球体 较大 相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部通道,只能在凝胶外部移动,移动路程短,移动速率较快 (4)维持蛋白质(酶)的结构和活性
解析:葡萄糖异构酶能将葡萄糖转化成果糖,图1中固定酶的方法为物理吸附法;包埋法是固定化酵母细胞常用的方法。由于固定化酶能与产物分离,因此提高了产物的纯度;同时,固定化酶能够重复利用,因此提高了酶的利用率。在分离蛋白质的凝胶色谱法中,凝胶颗粒实际上是一些微小的多孔球体,由于大分子的蛋白质不能进入凝胶内部通道,只能在凝胶外部移动,故移动路程短,移动速率快,最先流出层析柱。蛋白质的空间结构受pH影响,用磷酸缓冲溶液的目的是维持蛋白质适宜的pH环境,避免蛋白质结构被破坏。
科目:高中生物 来源:2012-2013学年江苏省高三最后一次模拟考试生物试卷 题型:综合题
回答下列关于基因工程的问题。
草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡。但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内, 从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。
下图A-F表示6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题:
(1)若A-C浇清水,D-F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是_________。
(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。
(3)假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图1所示,则应选择表中酶__________进行酶切;若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图1和2所示,则应选择表中酶__________ 进行酶切。
(4)假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图2所示,请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。(2分)
(5)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因_____________。
下图甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000对碱基)与大肠杆菌pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧,其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)
(6)图乙的培养基中含有氨苄青霉素,请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中,何种会含有重组质粒。___________。
(7)现用EcoRI酶切质粒,酶切后进行电泳观察,若出现长度为_________kb和 kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计)
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科目:高中生物 来源:2012-2013学年江苏省高三最后一次模拟考试生物试卷(解析版) 题型:综合题
回答下列关于基因工程的问题。
草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡。但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。
下图A-F表示6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题:
.
(1)若A-C浇清水,D-F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是_________。
(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。
(3)假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图I所示,则应选择表中酶__________进行酶切;若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图I和II所示,则应选择表中酶__________ 进行酶切。
(4)假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图II所示,请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。(2分)
(5)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因_______________________________________________________________。
下图甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000对碱基)与大肠杆菌pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧,其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)
(6)图乙的培养基中含有氨苄青霉素,请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中,何种会含有重组质粒。___________。
(7)现用EcoRI酶切质粒,酶切后进行电泳观察,若出现长度为_________kb和 kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计)
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科目:高中生物 来源:2013届黑龙江龙东高二下学期高中教学联合体期末生物试卷(解析版) 题型:综合题
下表中列出几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题。
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有 个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越 。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ,原因是 。
(3)与使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
(4)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
(5)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在 的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
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科目:高中生物 来源:江苏省南通市2010届高三第一次模拟考试(生物) 题型:综合题
(7分)女娄菜为雌雄异株的植物,下列图1为女娄菜的性染色体组成。已知女娄菜的叶型有宽叶和窄叶两种类型,由一对基因(B和b)控制。由于基因突变,导致其某种基因型的花粉粒死亡。现有下列杂交实验,结果如图2表中所示。请回答:
(1)图1中②号染色体为 染色体,②号染色体上除Ⅳ区外的基因的遗传特点是 。
(2)控制女娄菜叶型的基因在 染色体上,宽叶基因是 性基因。
(3)第1组和第2组杂交实验的子代都没有雌性植株,推测其可能原因是
。
(4)第2组杂交实验中亲本中的雌株和雄株的基因型分别为 。
(5)若让第3组子代的宽叶雌株与宽叶雄株杂交,预测其后代中宽叶与窄叶的比例为 。
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科目:高中生物 来源: 题型:单选题
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